国产龙血竭基原植物类黄酮3′-羟化酶基因(F3′H)克隆及表达分析

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类黄酮3′-羟化酶(flavonoid 3′-hydroxylase, F3′H)作为植物类黄酮代谢的关键酶之一,参与龙血树中龙血竭树脂的生物合成。为了揭示国产龙血竭基原龙血树中F3′H基因序列和表达模式等信息,本研究以剑叶龙血树、海南龙血树和岩棕为研究对象,采用同源克隆法克隆3种龙血竭基原植物的F3′H基因序列并进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法分析其在不同组织的表达量。结果表明,在3种龙血树中均获得一条编码区长1 533 bp的F3′H基因序列,同源性达99.57%,编码510个氨基酸残基,氨基酸序列的理化性质、二级结构和三级结构几乎完全一致。系统进化分析表明龙血树属植物F3′H基因聚为一支且进化上非常接近,在F3′H进化树上龙血树属并未与同科植物聚为一类,单子叶植物和双子叶植物亦并未分别聚为一类。qRT-PCR分析发现,剑叶龙血树中F3′H在茎中的表达量远高于根和叶,海南龙血树和岩棕中F3′H在茎中的表达量低于根和叶。本研究有利于揭示F3′H在龙血竭生物合成中的潜在作用,为龙血竭人工结脂技术开发提供一定分子基础。
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