【摘 要】
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生长素响应因子ARF在植物生长发育过程中发挥着重要的作用.本研究采用同源克隆和RACE相结合的方法,从杂交鹅掌楸叶片中克隆ARF2的同源基因,命名为LhARF2,对基因蛋白序列进行
【机 构】
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江西省科学院生物资源研究所,江西省观赏植物遗传改良重点实验室,南昌,330096
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生长素响应因子ARF在植物生长发育过程中发挥着重要的作用.本研究采用同源克隆和RACE相结合的方法,从杂交鹅掌楸叶片中克隆ARF2的同源基因,命名为LhARF2,对基因蛋白序列进行生物信息学分析,基因全长3 193 bp,包含2 589 bp的开放阅读框,编码862个氨基酸的蛋白质.蛋白质分子量为96.19 kD,理论等电点为6.21,为不稳定蛋白质;蛋白质二级结构包括α-螺旋、β-折叠、不规则卷曲和延伸链,以不规则卷曲为主;蛋白质三级结构分析显示该蛋白与拟南芥生长素响应因子(SMTL编号:41dy.1)的序列相似性最高(67.89％).功能结构域分析显示该蛋白质包括B3、Auxin_resp和AUX_ IAA结构域.系统进化树分析表明LhARF2所编码的蛋白质与莲(Nelumbo nucifera) XP_010250544.1亲缘关系最近.激素诱导生根试验表明,拟南芥T2代幼苗相比较野生型,在没有激素处理下,根系长度差异不大;在外源激素IBA处理下,根系长度明显伸长.实时定量分析显示在IBA激素诱导下,根系和叶片表达量均上调,根系中LhARF2上调幅度分别高于WT和叶片.结果 表明LhARF2基因在拟南芥中对根的生长具有促进作用,LhARF2基因受IBA激素正向调控.该研究结果为进一步分析杂交鹅掌楸LhARF2基因的功能及利用奠定基础.
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