【摘 要】
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目的在大肠杆菌中高水平表达并分离纯化心脏特异表达基因p93的激酶与丝氨酸结构域片段.方法利用DNA重组技术,构建C末端带有6×His标签的p93激酶与丝氨酸结构域(p93-C)片
【机 构】
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100037,100037,133000
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目的在大肠杆菌中高水平表达并分离纯化心脏特异表达基因p93的激酶与丝氨酸结构域片段.方法利用DNA重组技术,构建C末端带有6×His标签的p93激酶与丝氨酸结构域(p93-C)片段的原核表达载体pET28a-p93-C.对诱导表达条件和包涵体洗涤条件优化后,用Ni2+金属螯合吸附层析柱纯化.结果成功构建了pET28a-p93-C原核表达载体,诱导后摇床转速在350r/min下表达量最高,包涵体洗涤在超声条件下较好,分离纯化后从100ml菌液中可获得2.5mg蛋白.结论建立了高效稳定的p93-C原
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