【摘 要】
：
腈水解酶（Nitrilase，EC 3.5.5.1），是一类可以将腈类物质一步水解为羧酸的酶，是多种重要大宗化工品、药物中间体的理想生物催化剂。但是天然酶活性低、热稳定性差限制了其在工业上的应用。近年来通过蛋白质改造来解决酶活性与稳定性间的“trade-off”效应以提升催化性能是研究热点。该研究提出一种酶-底物亲和设计改造策略，以来源于Syechocystis sp. PCC6803的腈水解酶N
【基金项目】
：
江苏省自然科学基金（BK20210470）； 中国博士后科学基金（2021M701461）；
论文部分内容阅读
腈水解酶（Nitrilase，EC 3.5.5.1），是一类可以将腈类物质一步水解为羧酸的酶，是多种重要大宗化工品、药物中间体的理想生物催化剂。但是天然酶活性低、热稳定性差限制了其在工业上的应用。近年来通过蛋白质改造来解决酶活性与稳定性间的“trade-off”效应以提升催化性能是研究热点。该研究提出一种酶-底物亲和设计改造策略，以来源于Syechocystis sp. PCC6803的腈水解酶Nit6803作为改造对象，结合基于Rosetta的Cartesian＿ddG方法和基于自由能微扰的酶-底物亲和力计算，对Nit6803的催化口袋进行单点突变及组合突变设计。基于此获得了活性显著提升的单点突变体F64Y、W170G，及组合突变体F64Y/W170G。其中，F64Y/W170G的比酶活达到（22.48±0.64）U/mg，为野生型的4.56倍，且该突变体的热稳定性不低于野生型。通过分批补加3-氰基吡啶进行全细胞催化表明F64Y/W170G催化能力强于野生型，在达到相同转化率情况下极大的缩短了催化时间。结果表明，该研究提出的设计策略可以有效提升酶的活性而不影响其稳定性，为酶的理性设计改造提供了新的思路。
其他文献
背景:肥胖在全球范围内广泛流行,与许多慢性疾病相关,如心血管疾病、非酒精性脂肪肝、2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus,T2DM）等。其中T2DM发病的关键是胰岛β细胞数量进行性衰退及胰岛素分泌障碍。因此维持胰岛β细胞的数量和胰岛素的正常分泌是防治T2DM的根本方法。尽管临床上肥胖患者胰岛β细胞数量代偿性增多,但相当部分肥胖者仍然会进展为T2DM。这提示肥胖条件下可能存在着
【教学背景】"单式折线统计图"是人教版小学数学教材五年级下册第七单元的教学内容。在本单元学习之前,学生已经掌握了收集、整理、描述、分析数据的基本方法,会用统计表和条形统计图来表示统计结果,并能根据统计表、条形统计图解决简单的实际问题。在此基础上,教材编排了新的统计图──折线统计图（单式和复式）,目的是让学生了解单式折线统计图和复式折线统计图的特点和思想,根据折线的变化特点对数据进行简单的分析
D.A.R.E项目是美国最成功的学校药物滥用预防教育项目,在大麻、阿片类毒品、处方/非处方药物、酒精、电子烟等药物滥用课程理念、内容、实施、评价等方面积累了丰富经验,通过文献和调查研究,本文阐释了D.A.R.E药物滥用项目科学化、循证式的设计理念,介绍了小学、中学、大学药物滥用预防教育的分层次、多元化课程内容、互动式、网络化的教学方法以及多方参与的课程评价模式,对我国探索去中心化的药物滥用尤其是禁
《刑事审判参考》通过一系列典型案例,既阐释了合同诈骗罪的犯罪构成,也展现了解读犯罪构成的方法:根据合同诈骗罪的保护法益来确定"合同"的范围;通过分析"骗取财物"与"合同"的内在联系来明确合同诈骗罪的本质是"利用合同实施诈骗";结合"利用合同实施诈骗"这一手段来限定合同诈骗的对象。总结和提炼合同诈骗罪典型案例中的裁判规则,对于解决骗取贷款、金融诈骗等犯罪的疑难问题具有指导意义:通过对诈骗犯罪中"欺骗
目前,劳务派遣工作为一种新的用工形式,在企业中已被普遍使用,尤其在国有企业是一股重要力量。但是,由于对薪酬福利不满意、工作年限受限等一系列因素造成劳务派遣工流失较为严重。这不仅造成企业成本的增加,对企业安全生产也构成了一定的威胁。尽管企业为了稳定劳务派遣工群体也在不断摸索新的办法,但每年仍有大量劳务派遣工不辞而别,因此,如何通过有效的措施稳定劳务派工队伍已成为企业迫切要解决的现实问题。
塑料的出现为人类的生活和生产提供了极大的便利,然而塑料污染已成为21世纪人类面临的最迫切的环境问题之一。尤其是当塑料碎片释放到水生环境中后,会进一步降解为微塑料（MPs）和纳米塑料（NPs）,而这些微型塑料易被水生生物摄入引发一定的生态风险。高效氰戊菊酯（FEN）是一种Ⅱ型拟除虫菊酯类杀虫剂,对哺乳动物肝脏组织产生不利影响,并且对水生生物具有高毒性。先前的研究多关注于FEN的神经发育毒性、生殖毒性