应用复合多聚酶链反应方法快速鉴别伪狂犬病弱毒疫苗与野毒

来源 :城市道桥与防洪 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gamebugs2009
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本研究根据伪狂犬病病毒(PrV)共有gB和疫苗株缺失的gE基因序列分别设计并合成1对通用(PB1/PB2)和1对鉴别引物(PE1/PE2),以在我国广泛使用的疫苗株Bartha-K61及从国内外收集的野毒株S、SU、F、L、Y、Min-A、Shope、S(川)、SL1、10#、EA(鄂A)DNA为模板在同一反应管中同时扩增gB和gE基因序列建立了复合多聚酶链反应(PCR)方法.PCR产物经2.0%琼脂糖凝胶电泳显示,从所有11株野毒DNA中都扩增出372 bp和526 bp两个片段,而Bartha-k61只扩增出372 pb一个片段.酶切分析证明PCR产物是特异性的.gB基因是PrV主要保护性抗原基因,是病毒复制必需的,强弱毒都有此基因;Bartha-K61株是gE基因缺失的弱毒.所以,本实验建立的方法通过1次PCR即可有效鉴别疫苗毒与野毒.这一方法将在今后根除伪狂犬病计划中发挥重要作用.
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