【摘 要】
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目的建立一种基于悬液芯片的呼吸道病毒多重检测方法,对4种呼吸道病毒或亚型进行快速检测和鉴定,包括人类偏肺病毒,呼吸道合胞病毒,流感病毒A和流感病毒B。方法依据NCBI公开
【机 构】
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复旦大学生命科学学院,上海200433;联合基因生物医药有限公司,上海200433;联合基因生物医药有限公司,上海,200433;复旦大学上海医学院,上海,200032;复旦大学附属儿科医院儿科研究所
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目的建立一种基于悬液芯片的呼吸道病毒多重检测方法,对4种呼吸道病毒或亚型进行快速检测和鉴定,包括人类偏肺病毒,呼吸道合胞病毒,流感病毒A和流感病毒B。方法依据NCBI公开数据库上各病毒的基因序列信息,设计并合成相关引物探针序列。抽提病毒RNA,经反转录后对目的序列进行PCR扩增,产物与核酸探针微球组杂交后于BioPlex 200检测荧光信号值。结果优化了多重PCR方法,hMPV、RSV与IfB的悬液芯片检测灵敏度约3DNA拷贝,IfA的悬液芯片检测灵敏度约30DNA拷贝。4种病毒或亚型同时检测的特异性高,省时,无交叉反应。17个经传统方法鉴定为呼吸道病毒的临床标本用悬液芯片检测16个阳性,检出率94.1%。标本经测序分析验证,结果与悬液芯片法一致。结论建立的同时检测4种呼吸道病毒或亚型的悬液芯片方法特异性高,为快速筛查和鉴定呼吸道病毒提供了新的手段。
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