【摘 要】
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目的:为了利用噬菌体内溶素防控副溶血弧菌,通过克隆表达工程菌pET30a—CHAP制备目的蛋白,并将以包涵体存在的目的蛋白复性得到有活性的噬菌体内溶素蛋白。方法:首先克隆工程菌pE
【基金项目】
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现代农业产业技术体系专项经费资助(CARS-47);“十二五”国家科技支撑计划(2015BAD16B0902)
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目的:为了利用噬菌体内溶素防控副溶血弧菌,通过克隆表达工程菌pET30a—CHAP制备目的蛋白,并将以包涵体存在的目的蛋白复性得到有活性的噬菌体内溶素蛋白。方法:首先克隆工程菌pET30a—CHAP,经IPTG的诱导表达后,检测菌液上清中内溶素含量判断表达形式,再进行诱导条件初步优化。通过将表达的pET30a—CHAP包涵体蛋白先用洗涤剂洗涤去除杂蛋白,然后用尿素变性荆溶解,并用Ni2+ SepharoseTM6 FastFlow亲和层析柱进行层析纯化,用EDTA、氧化型谷胱甘肽、还原型谷胱甘肽等为折叠复
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