猪流行性腹泻病毒纳米抗体融合蛋白真核表达及鉴定

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【摘要】

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为防控猪流行性腹泻病毒(PEDV)病的流行,构建了靶向PEDV NB3-NB6-Fc纳米抗体融合蛋白的真核表达载体,并探究能否在毕赤酵母中分泌表达。通过实验室保存的pUC57-NB3-NB6-Fc质

【作者】

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郭涛李村院刘开平李晓悦胡瑞瑞李雅心王小奎倪伟

【机构】

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石河子大学生命科学学院,石河子大学动物科技学院

【出处】

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动物医学进展

【发表日期】

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2021年4期

【关键词】

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猪流行性腹泻病毒纳米抗体融合蛋白毕赤酵母分泌表达 Porcine epidemic diarrhea virus nanobody fusio

【基金项目】

：

2019年自治区研究生科研创新项目(XJ2019G11),“兵团英才”第二周期第一层次培养人选项目

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为防控猪流行性腹泻病毒(PEDV)病的流行,构建了靶向PEDV NB3-NB6-Fc纳米抗体融合蛋白的真核表达载体,并探究能否在毕赤酵母中分泌表达。通过实验室保存的pUC57-NB3-NB6-Fc质粒,成功构建分泌表达载体pPIC9K-NB3-NB6-Fc,经SacⅠ酶将其线性化并电转化入毕赤酵母GS115菌株。经过MD、梯度G418-YPD平板和PCR方法筛选多拷贝阳性重组转化子。经鉴定为阳性重组菌株用8 mL/L甲醇在29℃条件下诱导72 h,用SDS-PAGE和Western blot方法检测上清液

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