尿儿茶酚胺LC-MS/MS检测方法的建立

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目的建立尿液儿茶酚胺[包括肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)]的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法。方法以E-d3、NE-d6和DA-d4盐酸盐为内标,采用WATERS ACQUITY UPLCHSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)进行分离。流动相A1为2‰甲酸水溶液,流动相B1为甲醇(纯度为99.9%),流速为0.5 m L/min,按A1∶B1=95∶5等度洗脱。采用电喷雾(ESI)正离子模式进行质谱分析。对方法的线性、准确度(回收率)、不精密度及最低检出限等进行性能验证。选取表面健康人群65名,建立E、NE和DA的参考区间。结果采用建立的LC-MS/MS检测尿液E、NE和DA,保留时间分别为0.58、0.89和0.63 min,检测范围为0.50~800.00 ng/m L。E、NE和DA的加标平均回收率分别为97.95%、97.78%和101.03%,最低检出限分别为0.25、2.50和2.50 ng/m L。E、NE和DA的参考区间分别为5.4~25.8、28.5~73.1和269.1~420.5μg/24 h。结论建立的LC-MS/MS方法能同时检测尿液中的E、NE和DA,可为嗜铬细胞瘤的诊断提供可靠的信息。
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