【摘 要】
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目的探讨普鲁卡因与5′-氮杂-2′-脱氧胞苷(5′-Aza-2′-deoxycycytidine,5-aza-dc)对人肝肿瘤细胞株HepG2经典Wnt信号通路抑制因子-1(Wif-1)基因启动子脱甲基化作用的影响。
【机 构】
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重庆医科大学附属第二医院消化内科,成都军区总医院消化内科,
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目的探讨普鲁卡因与5′-氮杂-2′-脱氧胞苷(5′-Aza-2′-deoxycycytidine,5-aza-dc)对人肝肿瘤细胞株HepG2经典Wnt信号通路抑制因子-1(Wif-1)基因启动子脱甲基化作用的影响。方法以普鲁卡因或5-aza-dc干预HepG2细胞,采用RT-PCR及Western blot检测干预前后Wif-1基因mRNA及蛋白的表达;甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)检测干预前后HepG2细胞中Wif-1甲基化变化。结果 RT-PCR和Western blot结果显示经普鲁卡因或5-aza-dc作用前HepG2细胞Wif-1基因mRNA与蛋白呈低表达或缺失,经普鲁卡因或5-aza-dc作用后HepG2细胞Wif-1基因mRNA与蛋白呈高表达,各组间比较差异有统计学意义,且普鲁卡因实验组表达高于5-aza-dc实验组(P<0.05)。MSP结果显示,经普鲁卡因或5-aza-dc干预后HepG2细胞与干预前HepG2细胞比较均呈部分脱甲基化状态,对应的甲基化率分别为(14.41±3.37)%和(29.29±1.84)%(P<0.05)。结论普鲁卡因及5-aza-dc均可影响Wif-1基因启动子CpG岛的甲基化状态。普鲁卡因可以作为一种新的去甲基化药物且效果优于常规药物5-aza-dc。
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