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反义bcl—2基因逆转录病毒表达载体的构建

来源 :福建医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：iobject

【摘 要】

：

目的克隆bcl-2基因,构建其不同反义核酸的逆转录病毒表达载体。方法设计一对两端带有EcoRⅠ酶切位点的引物,RT-PCR克隆含bcl-2全部编码区的848 bp片段,并连接到T载体,测序正

【作 者】

：

林祥华 陈志哲 杨婷 吕联煌 

【机 构】

：

福建医科大学附属协和医院

【出 处】

：

福建医科大学学报

【发表日期】

：

2001年1期

【关键词】

：

反义bcl-2基因 逆转录病毒 表达载体 构建 oligonucleoticle antisense  retroviridae 

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目的克隆bcl-2基因,构建其不同反义核酸的逆转录病毒表达载体。方法设计一对两端带有EcoRⅠ酶切位点的引物,RT-PCR克隆含bcl-2全部编码区的848 bp片段,并连接到T载体,测序正确后正反向亚克隆到pLXSN中EcoRⅠ位点;从pBluescriptⅡSK(-)bcl-2中用BamHⅠ切下含有bcl-2阅读框起始部位的部分编码区亚克隆到pLXSN BamHⅠ位点。结果构建带有正反向含bcl-2阅读框的全部编码区和部分编码区的逆转录病毒表达载体。结论在已知基因序列克隆中,联合RT-PCR和T载体是

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