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【摘要】 目的 观察镍铬合金、钻铬合金、金合金3组金属烤瓷冠修复前后不同时期龈沟液（GCF）内白细胞介素-1（IL-1）水平变化，了解3种金属烤瓷冠在不同时期对牙龈的刺激程度。方法 将42例前牙行金属烤瓷单冠修复的患者，分成镍铬合金、钻铬合金、金合金烤瓷冠修复三组，于修复前及修复后1个月、3个月、6个月检测基牙GCF中IL-1的含量。结果 PFM修复后1个月三组的IL-1含量较修复前均增加（P<0.05），修复后3个月三组PFM基牙龈沟液中IL-1含量较修复后1个月明显下降（P<0.05），镍铬合金组IL-1含量高于修复前（P<0.05），钻铬合金、金合金组PFM修复后3个月与修复前比较差异无统计学意义（P>0.05）；修复后6个月钻铬合金、金合金中IL-1含量差异无统计学意义（P>0.05），修复后6个月钻铬合金、金合金组IL-1的含量均低于镍铬合金组（P<0.05）。结论 IL-1参与炎症的免疫调节，可作为评价不同金属烤瓷冠对牙龈组织刺激程度的指标，不同合金烤瓷冠内冠材料对牙龈存在不同的长期刺激，所以临床上金属烤瓷冠修复时对内冠材料的选择应加以考虑。
【关键词】 镍铬合金；钻铬合金；金合金；龈沟液；白细胞介素-1（IL-1）
doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.11.157 文章编号：1004-7484（2013）-11-6271-02
随着人们对牙齿美容的要求不断提高，同时更加关注修复体与人体的相容性。金属烤瓷冠不仅具有较好的美观效果，而且较低的价格，现已被大多数患者所接纳，然而患者在应用一段时间后牙龈萎缩、牙龈炎发生率呈上升趋势，严重影响了牙冠修复的长期效果[1]。由于烤瓷铸造合金在口腔局部破坏环境中释放出离子，沉积于牙龈和牙体表面，对与其接触的牙周组织造成一定的刺激，促进牙龈炎症发展，这是引起修复后牙周损伤的重要因素。白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）是一种信使因子[2]，在牙周病的发生过程中起着重要的作用。现观察不同种类合金烤瓷冠修复前后GCF中IL-1含量及龈沟液（gingival crevicular fluid，GCF）总量变化，初步探讨不同合金烤瓷冠对牙周组织的影响程度，为以后临床选择合理金属烤瓷冠提供参考根据。
1 资料与方法
1.1 临床选择 选取2009年——2012年来本院修复的患者，从中随机选取钻铬合金、镍铬合金、金合金烤瓷修复的患者共42例，患牙共42颗，每组均14例。均采取单冠修复的患者，年龄20-50岁。选择标准：①中切牙或侧切牙行PFM单冠。②牙齿修复前均为活髓牙，无牙周炎症状、根尖周、及影像学改变。③测试患者口腔卫生习惯良好，无系统病患，无金既往过敏史。④近期内没有使用免疫抑制剂和抗生素。⑤女性患者非月经期，无妊娠。⑥排除肿瘤患者。⑦并告知患者治疗的并发症和可能出现的危险，患者并签署知情同意书，经知情同意于烤瓷冠佩戴前和佩戴后1、3、6个月复诊时进行龈沟液及其白细胞介素-1含量测定开展研究，研究方案经漯河医专第三附属医院医学伦理委员会批准。严格遵守牙体预备的原则：颈缘位于龈下0.5-1.0mm，肩台均为135度角，经过排龈，采用硅橡胶印膜材制取印模，灌注石膏模型，临时冠制作。为防止制备上的误差，牙体预备和印模制取均由本人完成，义齿制作均由同一技工师完成。
1.2 设备与材料 钴铬合金（Bego公司，德国）；镍铬合金（Heraeus，德国）金合金（广东深圳市时代义齿配制有限公司）；烤瓷炉、欧美加900瓷粉（vita，德国）；临时冠（DMG公司，德国）；印模材料（Heareus，德国）；石膏粉（德派牙科技术有限公司）；3-0无药排龈线（3M，美国）；聚羧酸水门汀（3M ESPE，德国）；IL-1酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒（上海沪峰生物公司）0.05%（V/V）；Tween 20-PBS洗提液。
1.3 样品采集 分别对钻铬合金、镍铬合金、金合金烤瓷冠修复前以及修复后1、3、6个月对基牙GCF取样，采用滤纸吸着法对每组患牙收集龈沟液。将Whatman滤纸裁成2mm X10mm的纸条以备用，从中随机取3条放人有标记Eppendorf管中，称重、编号。首先用棉球隔湿患牙，并用无菌干棉球擦干牙面，在每颗牙4个区进行取液，即近远中、唇舌侧，将滤纸条放入龈沟中，30s后取出滤纸条，若沾染血液、唾液则重新制取。取样后立即用精密天平称量，前后差值即为龈沟液的量，然后放于离心管中，于-80℃冰箱冷藏待检。
1.4 IL-1β测定 从冷藏室取出样本，室温解冻，分离后由漯河医学高等专科学校第三附附属医院测定GCF及IL-1，测定方法采用双抗体夹心酶联免疫法.根据已测定的龈沟液量。按1：100稀释要求加人适量0.05%Tween-20洗提液，室温摇床1h（150r/min），4℃离心（10000r/min）10min，取上清液，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定IL-1。
1.5 统计学分析 所有数据输入SPSS12.0后进行统计，所有检验均为双侧检验，显著水平为P<0.05，显著水平0.05 2 结 果
研究发现，三组修复前GCF中IL-1含量差异均无统计学意义（P>0.05），说明修复前3组基牙牙周健康水平相当。烤瓷冠修复后1个月三组的IL-1含量均较修复前增加，有统计学意（P<0.05），但三组之间的差异无统计学意义（P>0.05）。镍铬合金在修复后3、6个月IL-1总量以及GCF量与修复前相比较，差异有统计学意义（P<0.01）。钴铬合金、金合金烤瓷冠在修复后3个月GCF量、IL-1总量与修复前水平基本相当（P>0.05）。修复后6个月，三组烤瓷冠基牙龈沟液中IL-1含量较修复后1个月明显下降，差异有统计学意义（P<0.05）；镍铬合金组GCF量明显高于修复前（P<0.05），金合金、钻铬合金组烤瓷冠修复后6个月与修复前比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。 3 讨 论
白细胞介素是牙周炎及其牙槽骨吸收的重要致炎因子，IL-1有IL-1a和IL-lβ，其中IL-1β是一种重要的炎性介质。IL-1β的靶细胞之一是牙周膜中成纤维细胞，IL-1β可作用于受体，产生多种生物学效应[3].并与牙周组织的破坏直接相关，IL-1不仅可以促近炎症的发生，还可诱导前列腺素E合成、分解、代谢能力加强、活化破骨细泡，进而促进骨吸收，同时IL-1β可诱导金属蛋白酶的产生，进而对基质中的胶原降解、破坏，同时能降解Ⅰ-Ⅴ型胶原、明胶、粘蛋白及纤维蛋白[4]。有学者研究表明：在患有牙周附着丧失的部位和牙龈炎的龈沟液中，IL-1的含量明显高于牙周健康部位龈沟液中IL-1的含量[5]有的学者还发现：牙周致病菌携带者龈沟液中IL-1的水平与龈沟出血指数、菌斑指数、附着丧失、牙周袋探珍深度有着一定的关系。因此龈沟液中IL-1水平变化能较好的反应牙周组织的早期改变。当牙周组织发生炎症时，龈沟间隙增大，上皮血管通透性增加，龈沟液的流速和量也随之提高。龈沟液能够客观反映当牙周组织发生炎证时，宿主对病原刺激的自然反应状况，而龈沟液量的增加被认为是牙龈炎症早期变化的敏感指标。因为金属烤瓷冠修复后，改变了局部原有龈沟液的环境，引起局部的免疫反应，引起一系列复杂的生物学反应，产生多种生物化学物质，如酶、细胞因子、炎症介质等，化学物质作为细胞信号，反映了牙周组织的活动状态并对牙周组织的修复和重建起到调控作用[6]。
本次研究结果显示：3组烤瓷修复体在修复后1个月的GCF量和IL-1总量均较修复前差异有统计学意义（P<0.05），说明3组烤瓷修复体在早期修复均对牙周组织的健康有一定的影响，镍铬合金在修复后3、6个月GCF量和IL-1总量较修复前差异有统计学意义（P<0.01），金合金及钴铬合金在修复后3、6个月GCF量和IL-1总量较修复前差异无统计学（P>0.05），表明不同合金烤瓷冠和戴入时间与IL-1水平变化有着一定相关性，此次研究说明由此可金合金和钻铬合金在性能方面优越于镍铬合金烤瓷冠。是临床上比较理想的修复体，但对于长期的效果还有待于进一步探讨与研究。
镍铬合金材料的生物安全性在国内外均存在争论，在口腔材料领域。镍铬合金材料被广泛用于义齿修复和正畸治疗。体外人工唾液试验证实镍铬合金在口腔局部环境中确实存在镍离子和铬离子的暂时性释放[7]是炎症前细胞因子的代表，即炎症过程的启动是由“更早”的细胞因子如IL-1诱导产生的，而后通过刺激一些次级的介质，包括趋化因子和环氧化酶，逐级放大炎症过程，钴铬合金可在钝化膜表面形成比较连续致密氧化膜，提高合金耐腐蚀性能，进而具有良好的生物相容性。而金合金生物学性能、化学性能更稳定，因为金属离子的析出率远低于非贵金属析出，由此可见合金材料的差异可造成GCF量、IL-1的变化，本次通过研究对GCF中IL-1水平变化周期性动态检测，说明金合金、钴铬合金较镍铬合金具有良好的生物相容性，预后效果较好，为以后临床合理选择冠修复体提供必要的指导意义。
参考文献
[1] 马轩祥.我国瓷修复的问题与展望[J].中华口腔医学杂志，1999，34（5）：261-263.
[2] 屈道利，王佩丽，康雄俊.不同合金烤瓷修复体的临床应用180例[J].口腔医学，2007，27（6）：335-336.
[3] John C，Wataha SR，Carl T，et a1.In vitro IL-1 and TNF release from THP-1 monocytes in response to metal ions[J].Turk JMed Sci，2001，3（12）：365-369.
[4] 王仁飞，金晓华.烤瓷冠桥修复后1年后的牙周情况分析[J].口腔颌面修复学杂志，2003，4（3）：174-175.
[5] Gamonal J，Acevedo A，Bascones A，et a1.Levels of interleukin-1beta，-1，and-10 and RANTES in gingival crevicular fluid andcell populations in adult periodontitis patients and the effect ofperiodontal treatment[J].J Periodontol，2000，71（10）：1535-1545.
[6] 曾强，李玉玲.五种烤瓷合金在人工唾液中的离子析出研究[J].现代口腔医学杂志，2008，22（6）：621-623.
[7] 刘清辉.临床常用4种烤瓷合金耐蚀性的比较[J].口腔医学，2008，28（2）：89-91.
[8] L6pezAlfas JF，MartinezGomis J，Peraire M，et a1.Ion release from dental casting alloys as assessed by a continuous flow system：nutritional and toxicological implications[J].Dent Mater，2006，22（9）：832，837.
【关键词】 镍铬合金；钻铬合金；金合金；龈沟液；白细胞介素-1（IL-1）
doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.11.157 文章编号：1004-7484（2013）-11-6271-02
随着人们对牙齿美容的要求不断提高，同时更加关注修复体与人体的相容性。金属烤瓷冠不仅具有较好的美观效果，而且较低的价格，现已被大多数患者所接纳，然而患者在应用一段时间后牙龈萎缩、牙龈炎发生率呈上升趋势，严重影响了牙冠修复的长期效果[1]。由于烤瓷铸造合金在口腔局部破坏环境中释放出离子，沉积于牙龈和牙体表面，对与其接触的牙周组织造成一定的刺激，促进牙龈炎症发展，这是引起修复后牙周损伤的重要因素。白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）是一种信使因子[2]，在牙周病的发生过程中起着重要的作用。现观察不同种类合金烤瓷冠修复前后GCF中IL-1含量及龈沟液（gingival crevicular fluid，GCF）总量变化，初步探讨不同合金烤瓷冠对牙周组织的影响程度，为以后临床选择合理金属烤瓷冠提供参考根据。
1 资料与方法
1.1 临床选择 选取2009年——2012年来本院修复的患者，从中随机选取钻铬合金、镍铬合金、金合金烤瓷修复的患者共42例，患牙共42颗，每组均14例。均采取单冠修复的患者，年龄20-50岁。选择标准：①中切牙或侧切牙行PFM单冠。②牙齿修复前均为活髓牙，无牙周炎症状、根尖周、及影像学改变。③测试患者口腔卫生习惯良好，无系统病患，无金既往过敏史。④近期内没有使用免疫抑制剂和抗生素。⑤女性患者非月经期，无妊娠。⑥排除肿瘤患者。⑦并告知患者治疗的并发症和可能出现的危险，患者并签署知情同意书，经知情同意于烤瓷冠佩戴前和佩戴后1、3、6个月复诊时进行龈沟液及其白细胞介素-1含量测定开展研究，研究方案经漯河医专第三附属医院医学伦理委员会批准。严格遵守牙体预备的原则：颈缘位于龈下0.5-1.0mm，肩台均为135度角，经过排龈，采用硅橡胶印膜材制取印模，灌注石膏模型，临时冠制作。为防止制备上的误差，牙体预备和印模制取均由本人完成，义齿制作均由同一技工师完成。
1.2 设备与材料 钴铬合金（Bego公司，德国）；镍铬合金（Heraeus，德国）金合金（广东深圳市时代义齿配制有限公司）；烤瓷炉、欧美加900瓷粉（vita，德国）；临时冠（DMG公司，德国）；印模材料（Heareus，德国）；石膏粉（德派牙科技术有限公司）；3-0无药排龈线（3M，美国）；聚羧酸水门汀（3M ESPE，德国）；IL-1酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒（上海沪峰生物公司）0.05%（V/V）；Tween 20-PBS洗提液。
1.3 样品采集 分别对钻铬合金、镍铬合金、金合金烤瓷冠修复前以及修复后1、3、6个月对基牙GCF取样，采用滤纸吸着法对每组患牙收集龈沟液。将Whatman滤纸裁成2mm X10mm的纸条以备用，从中随机取3条放人有标记Eppendorf管中，称重、编号。首先用棉球隔湿患牙，并用无菌干棉球擦干牙面，在每颗牙4个区进行取液，即近远中、唇舌侧，将滤纸条放入龈沟中，30s后取出滤纸条，若沾染血液、唾液则重新制取。取样后立即用精密天平称量，前后差值即为龈沟液的量，然后放于离心管中，于-80℃冰箱冷藏待检。
1.4 IL-1β测定 从冷藏室取出样本，室温解冻，分离后由漯河医学高等专科学校第三附附属医院测定GCF及IL-1，测定方法采用双抗体夹心酶联免疫法.根据已测定的龈沟液量。按1：100稀释要求加人适量0.05%Tween-20洗提液，室温摇床1h（150r/min），4℃离心（10000r/min）10min，取上清液，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定IL-1。
1.5 统计学分析 所有数据输入SPSS12.0后进行统计，所有检验均为双侧检验，显著水平为P<0.05，显著水平0.05
研究发现，三组修复前GCF中IL-1含量差异均无统计学意义（P>0.05），说明修复前3组基牙牙周健康水平相当。烤瓷冠修复后1个月三组的IL-1含量均较修复前增加，有统计学意（P<0.05），但三组之间的差异无统计学意义（P>0.05）。镍铬合金在修复后3、6个月IL-1总量以及GCF量与修复前相比较，差异有统计学意义（P<0.01）。钴铬合金、金合金烤瓷冠在修复后3个月GCF量、IL-1总量与修复前水平基本相当（P>0.05）。修复后6个月，三组烤瓷冠基牙龈沟液中IL-1含量较修复后1个月明显下降，差异有统计学意义（P<0.05）；镍铬合金组GCF量明显高于修复前（P<0.05），金合金、钻铬合金组烤瓷冠修复后6个月与修复前比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。 3 讨 论
白细胞介素是牙周炎及其牙槽骨吸收的重要致炎因子，IL-1有IL-1a和IL-lβ，其中IL-1β是一种重要的炎性介质。IL-1β的靶细胞之一是牙周膜中成纤维细胞，IL-1β可作用于受体，产生多种生物学效应[3].并与牙周组织的破坏直接相关，IL-1不仅可以促近炎症的发生，还可诱导前列腺素E合成、分解、代谢能力加强、活化破骨细泡，进而促进骨吸收，同时IL-1β可诱导金属蛋白酶的产生，进而对基质中的胶原降解、破坏，同时能降解Ⅰ-Ⅴ型胶原、明胶、粘蛋白及纤维蛋白[4]。有学者研究表明：在患有牙周附着丧失的部位和牙龈炎的龈沟液中，IL-1的含量明显高于牙周健康部位龈沟液中IL-1的含量[5]有的学者还发现：牙周致病菌携带者龈沟液中IL-1的水平与龈沟出血指数、菌斑指数、附着丧失、牙周袋探珍深度有着一定的关系。因此龈沟液中IL-1水平变化能较好的反应牙周组织的早期改变。当牙周组织发生炎症时，龈沟间隙增大，上皮血管通透性增加，龈沟液的流速和量也随之提高。龈沟液能够客观反映当牙周组织发生炎证时，宿主对病原刺激的自然反应状况，而龈沟液量的增加被认为是牙龈炎症早期变化的敏感指标。因为金属烤瓷冠修复后，改变了局部原有龈沟液的环境，引起局部的免疫反应，引起一系列复杂的生物学反应，产生多种生物化学物质，如酶、细胞因子、炎症介质等，化学物质作为细胞信号，反映了牙周组织的活动状态并对牙周组织的修复和重建起到调控作用[6]。
本次研究结果显示：3组烤瓷修复体在修复后1个月的GCF量和IL-1总量均较修复前差异有统计学意义（P<0.05），说明3组烤瓷修复体在早期修复均对牙周组织的健康有一定的影响，镍铬合金在修复后3、6个月GCF量和IL-1总量较修复前差异有统计学意义（P<0.01），金合金及钴铬合金在修复后3、6个月GCF量和IL-1总量较修复前差异无统计学（P>0.05），表明不同合金烤瓷冠和戴入时间与IL-1水平变化有着一定相关性，此次研究说明由此可金合金和钻铬合金在性能方面优越于镍铬合金烤瓷冠。是临床上比较理想的修复体，但对于长期的效果还有待于进一步探讨与研究。
镍铬合金材料的生物安全性在国内外均存在争论，在口腔材料领域。镍铬合金材料被广泛用于义齿修复和正畸治疗。体外人工唾液试验证实镍铬合金在口腔局部环境中确实存在镍离子和铬离子的暂时性释放[7]是炎症前细胞因子的代表，即炎症过程的启动是由“更早”的细胞因子如IL-1诱导产生的，而后通过刺激一些次级的介质，包括趋化因子和环氧化酶，逐级放大炎症过程，钴铬合金可在钝化膜表面形成比较连续致密氧化膜，提高合金耐腐蚀性能，进而具有良好的生物相容性。而金合金生物学性能、化学性能更稳定，因为金属离子的析出率远低于非贵金属析出，由此可见合金材料的差异可造成GCF量、IL-1的变化，本次通过研究对GCF中IL-1水平变化周期性动态检测，说明金合金、钴铬合金较镍铬合金具有良好的生物相容性，预后效果较好，为以后临床合理选择冠修复体提供必要的指导意义。
参考文献
[1] 马轩祥.我国瓷修复的问题与展望[J].中华口腔医学杂志，1999，34（5）：261-263.
[2] 屈道利，王佩丽，康雄俊.不同合金烤瓷修复体的临床应用180例[J].口腔医学，2007，27（6）：335-336.
[3] John C，Wataha SR，Carl T，et a1.In vitro IL-1 and TNF release from THP-1 monocytes in response to metal ions[J].Turk JMed Sci，2001，3（12）：365-369.
[4] 王仁飞，金晓华.烤瓷冠桥修复后1年后的牙周情况分析[J].口腔颌面修复学杂志，2003，4（3）：174-175.
[5] Gamonal J，Acevedo A，Bascones A，et a1.Levels of interleukin-1beta，-1，and-10 and RANTES in gingival crevicular fluid andcell populations in adult periodontitis patients and the effect ofperiodontal treatment[J].J Periodontol，2000，71（10）：1535-1545.
[6] 曾强，李玉玲.五种烤瓷合金在人工唾液中的离子析出研究[J].现代口腔医学杂志，2008，22（6）：621-623.
[7] 刘清辉.临床常用4种烤瓷合金耐蚀性的比较[J].口腔医学，2008，28（2）：89-91.
[8] L6pezAlfas JF，MartinezGomis J，Peraire M，et a1.Ion release from dental casting alloys as assessed by a continuous flow system：nutritional and toxicological implications[J].Dent Mater，2006，22（9）：832，837.