凋亡抑制蛋白Livin-α、Livin-β的原核表达及纯化

来源 :现代肿瘤医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gift19852003
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目的:对凋亡抑制蛋白Livin的两种异构体( Livin-α和Livin-β)进行原核表达,对获得的Livin蛋白进行纯化。方法:以Hela细胞总RNA为模板,RT-PCR获得Livin-α和Livin-β基因全长cDNA序列,酶切后,插入原核表达载体pET32a(+)的多克隆位点,经酶切、PCR鉴定、测序后,构建Livin基因异构体表达载体pET32a(+)-Livin-α和pET32a(+)-Livin-β。将重组质粒转入表达菌株BL21,诱导表达,收集菌液,超声碎菌,取其上清和沉淀分别进行 SDS-
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