【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA(Long noncoding RNA,LncRNA)LEF1反义RNA1(LEF1 anti-sense RNA 1,LEF1-AS1)是否通过靶向微小RNA-339-5p(MicroRNA-339-5p,miR-339-5p)来影响1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-pyridinium,MPP+)诱导的人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞损伤.方法 定量逆转录聚合酶链反应(Quantitative reverse transcription-po
【机 构】
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061000 河北省沧州市中心医院神经内七科;061000 河北省沧州市中心医院神经内四科;061000 河北省沧州市中心医院中医一科
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目的 探讨长链非编码RNA(Long noncoding RNA,LncRNA)LEF1反义RNA1(LEF1 anti-sense RNA 1,LEF1-AS1)是否通过靶向微小RNA-339-5p(MicroRNA-339-5p,miR-339-5p)来影响1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-pyridinium,MPP+)诱导的人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞损伤.方法 定量逆转录聚合酶链反应(Quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测LEF1-AS1和miR-339-5p在帕金森病患者中的表达水平;将SK-N-SH细胞分为con(对照)组、MPP+组(0.3 mmol/L MPP+)、MPP++小干扰RNA对照(Small interfering RNA-NC,si-NC)组(MPP+处理前转染si-NC)、MPP++si-LEF1-AS1组(MPP+处理前转染si-LEF1-AS1)、MPP++微小RNA对照(MicroRNA-NC,miR-NC)组(MPP+处理前转染miR-NC)、MPP++miR-339-5p组(MPP+处理前转染miR-339-5p)、MPP++si-LEF1-AS1+抗微小RNA对照(anti-MicroRNA-NC,anti-miR-NC)组(MPP+处理前共转染si-LEF1-AS1和anti-miR-NC)、MPP++si-LEF1-AS1+anti-miR-339-5p组(MPP+处理前共转染si-LEF1-AS1和anti-miR-339-5p);运用噻唑基蓝四唑溴化物(Thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法、比色法、流式细胞仪和Western Blotting检测细胞活力、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平、超氧化物歧化酶(Superoxide dis-mutase,SOD)活性、细胞凋亡和B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、Bcl-2蛋白表达水平;荧光素酶测定分析LEF1-AS1和miR-339-5p之间的靶向结合.结果 与正常人比较,帕金森病患者中LEF1-AS1表达水平升高,miR-339-5p表达水平降低(P<0.05);MPP+诱导SK-N-SH细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平、LEF1-AS1表达水平和MDA水平增高,Bcl-2蛋白表达水平、细胞活性(48、72 h)、miR-339-5p表达水平、SOD活性降低(P<0.05);干扰LEF1-AS1或过表达miR-339-5p后MPP+诱导的SK-N-SH细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平、MDA水平降低,Bcl-2蛋白表达水平、细胞活性(48、72 h)、miR-339-5p表达水平和SOD活性升高(P<0.05);LEF1-AS1靶向调控miR-339-5p的表达;抑制miR-339-5p可逆转干扰LEF1-AS1对MPP+诱导的SK-N-SH细胞损伤和氧化应激的影响.结论 干扰LEF1-AS1通过靶向miR-339-5p来减轻MPP+诱导的SK-N-SH细胞损伤.
其他文献
以55份油葵种质资源为材料,采用浓度为20％的聚乙二醇(PEG-6000)模拟干旱胁迫,以清水为对照,研究干旱胁迫下不同油葵种质资源萌发期抗旱特性的差异.结果表明,20％PEG-6000胁迫下,不同资源的相对发芽势、相对发芽率、相对胚芽长、相对胚根长、相对胚根数、相对鲜重6个指标表现并不一致,抗旱性评价需要进行多指标的综合考虑.采用隶属函数值和抗旱指标权重相结合的抗旱性度量值进行抗旱性评价,55个品种的D值在0.368～0.730,差异明显.并采用系统聚类分析的组间连接(平方欧式距离)法对品种综合能力D值
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草原是我国陆地生态系统的重要主体,也是生态文明建设的主战场之一.但草原资源本底不清,限制了草原的科学管理.按照牧区、半牧区、林区草原资源的差异性,分别选择典型县域进行案例分析.结果表明,由于草地认定标准差异、资源自身空间上的重叠、精度差异等方面原因,三调初步成果与原有的调查资料草地面积总量和空间分布均存在不同程度的差异;国土三调初步成果的图斑区划和属性因子不能满足草原资源经营管理的需求,应在三调的基础上进行经营区划和调查;草班和小班的区划要满足不同区域草原资源管理和经营的需要,调查内容包括类型、数量、质量
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为进一步提升烟叶采烤质量,降低烟农用工成本,2018—2020年在三门峡市陕州区开展了烟叶采烤一体化试验实施.结果表明,互助型和“1248”专业化型2种采烤一体化模式与烟农自烤模式(CK)相比,表现为“两降两升”,即用工量、烘烤成本降低,采分合格率和烤后烟叶经济性状显著提升;与CK相比,互助型、“1248”专业化型处理的总用工量分别减少2和5个/炕;烘烤总成本方面,分别降低了0.67和1.56元/kg;鲜烟分类合格率方面,三者之间差异显著;与CK相比,互助型、“1248”专业化型处理均价分别提高了0.77