【摘 要】
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探讨驴骨胶原蛋白对成纤维细胞(NHDFs细胞)增殖、迁移和I型胶原蛋白分泌的影响以及可能的作用通路.通过八肽胆囊收缩素(CCK-8)法、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法和划痕实验,研究驴骨胶蛋白对成纤维细胞增殖和迁移的影响,并利用转录组测序技术(RNA-seq)分析驴骨胶原蛋白作用于成纤维细胞的差异表达基因.结果表明,驴骨胶原蛋白对NHDFs细胞无毒性,且在0.16～5.0 g/mL内对NHDFs细胞有一定的促生长作用.0.75～1.50 g/mL的驴骨胶原蛋白能够促进NHDFs细胞增殖,且驴骨胶原蛋白
【机 构】
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国家胶类中药工程技术研究中心,东阿阿胶股份有限公司,山东聊城 252201;中国检验检疫科学研究院,北京 100176
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探讨驴骨胶原蛋白对成纤维细胞(NHDFs细胞)增殖、迁移和I型胶原蛋白分泌的影响以及可能的作用通路.通过八肽胆囊收缩素(CCK-8)法、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法和划痕实验,研究驴骨胶蛋白对成纤维细胞增殖和迁移的影响,并利用转录组测序技术(RNA-seq)分析驴骨胶原蛋白作用于成纤维细胞的差异表达基因.结果表明,驴骨胶原蛋白对NHDFs细胞无毒性,且在0.16～5.0 g/mL内对NHDFs细胞有一定的促生长作用.0.75～1.50 g/mL的驴骨胶原蛋白能够促进NHDFs细胞增殖,且驴骨胶原蛋白对NHDFs细胞增殖的影响呈现剂量依赖关系.1.50 g/mL的驴骨胶原蛋白可显著促进NHDFs细胞迁移和I型胶原蛋白的分泌.驴骨胶原蛋白作用于成纤维细胞后,共筛选出384个差异表达基因,其中172个基因上调,212个基因下调.GO功能富集分析结果表明,差异表达基因与中性粒细胞趋化性、中性粒细胞迁移、粒细胞趋化性等有关;KEGG通路富集分析表明,差异基因参与细胞因子-细胞因子受体相互作用、化学致癌、IL-17和TNF等重要生物学通路.推测,驴骨胶原蛋白可能通过IL-17和TNF-α介导CXCL趋化因子发挥促进皮肤伤口愈合的作用.本文明确了驴骨胶原蛋白促进伤口愈合的效果,填补驴骨胶原蛋白促进伤口愈合的研究空白,为驴骨胶原蛋白高值转化提供了思路.
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目的:研究玉竹多糖(Polygonatum odoratum polysaccharides,POP)对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导大鼠胸大动脉平滑肌细胞(A7r5)衰老的保护作用.方法:采用水提醇沉法提取POP,并通过苯酚-硫酸法测得POP中总糖含量.应用D-gal建立A7r5细胞衰老模型,采用MTT法、β-gal染色、活性氧(ROS)、JC-1染色法检测POP对D-gal诱导A7r5细胞衰老的保护作用.结果:POP多糖得率为8.23％,总糖含量为76.48％±0.036％.MT
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