【摘 要】
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EST(AW 0 5 5 733)是在SD大鼠脑内一特异表达基因cDNA的 3′端片段 ,与人和小鼠的一个转录抑制因子基因 (RP5 8)同源。利用RT PCR的方法 ,从SD大鼠脑中得到rRP5 8基因两个不
【机 构】
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中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所!上海200031; 中国科学院上海生命科学研究院生物工程研究中心!上海200233; 中国科学院上海生命科?;
【基金项目】
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中国科学院生物科学与生物技术研究特别支持费课题 (财政部专项 )的资助 (KJ95T 0 6 )&&
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EST(AW 0 5 5 733)是在SD大鼠脑内一特异表达基因cDNA的 3′端片段 ,与人和小鼠的一个转录抑制因子基因 (RP5 8)同源。利用RT PCR的方法 ,从SD大鼠脑中得到rRP5 8基因两个不同长度的转录本。全长的rRP5 8基因编码产物为C2 H2 型锌指蛋白 ,含两个保守结构域 :氨基端的POZ结构域及羧基端的锌指结构域 (ZFD)。在POZ和ZFD结构域之间的序列 ,BLAST搜索未发现保守结构 ,但是富含酸性氨基酸残基。将编码ZFD结构域 (nt10 33～ 15 6 9)及POZ结构域 (nt 1～ 372 )的序列克隆到原核表达载体 pQE30中 ,表达并分离纯化了His6 ZFD和His6 POZ(融合了 6个组氨酸标签的蛋白质产物 )。用His6 ZFD和His6 POZ免疫兔子后 ,得到了ZFD和POZ两者的多克隆抗体 ,并利用所制备的抗体进一步分析了rRP5 8基因多转录本产物在大鼠中的组织分布 ,免疫组织化学实验结果显示rRP5 8蛋白主要分布在小脑颗粒细胞中
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