【摘 要】
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羊肠道病毒(caprine enterovirus,CEV)感染为国内外新发疫病,其诊断方法尚缺乏研究.本研究依据CEV-JL14毒株的基因组序列,设计合成了 1对特异性引物,建立了检测CEV的RT-PCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行测定,同时应用该方法对疑似CEV感染的临床样品进行检测.结果显示,建立的检测CEV感染的RT-PCR方法具有特异性好、敏感性高、快速和简便等特点,最低检出限为1.13×103copies/μL.以建立的RT-PCR方法对通过ELISA方法确定的6份阳性样品和22份阴
【机 构】
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吉林大学动物医学学院教育部人兽共患病研究重点实验室,吉林长春130062
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羊肠道病毒(caprine enterovirus,CEV)感染为国内外新发疫病,其诊断方法尚缺乏研究.本研究依据CEV-JL14毒株的基因组序列,设计合成了 1对特异性引物,建立了检测CEV的RT-PCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行测定,同时应用该方法对疑似CEV感染的临床样品进行检测.结果显示,建立的检测CEV感染的RT-PCR方法具有特异性好、敏感性高、快速和简便等特点,最低检出限为1.13×103copies/μL.以建立的RT-PCR方法对通过ELISA方法确定的6份阳性样品和22份阴性样品进行检测,结果显示两者的符合率为100％.本研究建立的RT-PCR方法可用于CEV感染的诊断和流行病学调查.
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[目的]利用转录组测序技术,探究水稻萌发过程中激素信号转导和细胞内部氧化还原平衡的调控机理,以期增加对萌发过程中复杂调控机制的理解,促进萌发期基因组转录调控网络的构建,并挖掘调控种子萌发的相关基因,为水稻直播稻新品种选育提供理论参考.[方法]利用萌发0、24和48 h的种子进行动态转录组测序分析,以差异倍数≥2、错误发现率≤0.05为阈值筛选差异基因,并利用Gene Ontology(GO)和KEGG Pathway数据库对萌发不同阶段的差异基因进行分析注释;同时利用实时荧光定量PCR对测序结果进行验证;
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为探索新城疫病毒(NDV)F基因及其蛋白诱导细胞免疫的能力,本研究对基因Ⅶ型NDV CK/CH/LHLJ/1/06株F基因进行了密码子优化和修饰,将其克隆至真核表达载体,获得了重组质粒pCAF.将质粒pCAF转染至悬浮培养的细胞中,上清中表达的蛋白经纯化获得了重组蛋白proF.以构建的质粒pCAF及其重组蛋白proF作为DNA和亚单位疫苗,采用pCAF单独免疫、proF单独免疫、pCAF和proF联合免疫的方式分别免疫SPF鸡,免疫后分离外周血淋巴细胞,通过淋巴细胞增殖试验和细胞因子检测试验评估pCAF和
环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测技术具有快速、敏感、仪器简单的优势.为了达到多重鉴别检测的目的,将分子信标引入LAMP反应体系,建立一套鉴别不同毒力新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的可视化双重荧光RT-LAMP方法.分别设计2套扩增不同毒力Class Ⅱ NDVF基因的LAMP引物,针对区分NDV毒力的分子标志F蛋白裂解位点的基序差异设计2条分子信标.中、强毒NDV分子信标5\'端标记FAM
本试验旨在构建并获得共表达PCV2/PCV3 Cap蛋白的病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs).扩增PCV2 Cap及PCV3 Cap基因,将其克隆至pEASY-Blunt载体,分别命名为pEPC2、pEPC3,验证正确后将目的基因分别连接至杆状病毒双启动子表达载体pFastBaC-Dual,获得含有PCV2、PCV3 Cap基因的重组杆状病毒质粒pFBD-PC2-PC3.将该重组质粒转化至大肠杆菌DH10-BacTM感受态细胞,进行蓝白斑筛选与PCR鉴定,获得重组杆粒Bacm
摘 要：企业文化是企业发展的不竭动力，文化落地在优秀企业文化建设中具有关键性的作用。本文主要分析基层供电企业文化建设工作中现状，从而制定企业文化建设可行性的落地方案，确保基层供电企业文化建设的全面落地，以提高企业经营管理水平。 关键词：供电企业；文化建设；文化实证 随着社会经济的发展，企业管理模式不断更新，各大企业家开始重视企业文化的建设，以增强企业的核心竞争力。在企业建设过程中，只有实现落地
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为建立一种能同时检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛轮状病毒(BRV)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的多重PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的BVDV的5\'-UTR序列、BRV的VP6基因和IBRV的gB基因设计3对特异性引物,通过对反应条件的优化,建立了一种多重PCR检测方法.特异性试验结果表明,该方法对牛冠状病毒(BCoV)、牛细小病毒(BPV)、牛隐孢子虫没有交叉反应,特异性较好;灵敏性试验结果显示,该方法对BVDV、BRV和IBRV的最低检出限分别为1.44×105,1.38