【摘 要】
：
目的 探讨Yes相关蛋白(YAP)信号对胆碱缺乏/乙硫氨酸补充(CDE)饮食诱导慢性肝损伤模型小鼠肝组织胆管反应的影响以及体外对肝祖细胞增殖的影响.方法 采用CDE饮食喂养雄性野生型C57BL/6J小鼠3 w,采用Western blot和qPCR法检测肝组织YAP蛋白表达和基因水平;采用免疫组化法检测肝组织CK19表达,观察胆管反应程度;采用免疫荧光评估胆管反应细胞过程中YAP表达;采用两步灌注法分离原代肝祖细胞,以慢病毒感染肝祖细胞,将细胞分为YAP过表达(YAP-OE组)、过表达空载体(OE-con
【机 构】
：
200080 上海市 上海交通大学附属第一人民医院消化科
论文部分内容阅读
目的 探讨Yes相关蛋白(YAP)信号对胆碱缺乏/乙硫氨酸补充(CDE)饮食诱导慢性肝损伤模型小鼠肝组织胆管反应的影响以及体外对肝祖细胞增殖的影响.方法 采用CDE饮食喂养雄性野生型C57BL/6J小鼠3 w,采用Western blot和qPCR法检测肝组织YAP蛋白表达和基因水平;采用免疫组化法检测肝组织CK19表达,观察胆管反应程度;采用免疫荧光评估胆管反应细胞过程中YAP表达;采用两步灌注法分离原代肝祖细胞,以慢病毒感染肝祖细胞,将细胞分为YAP过表达(YAP-OE组)、过表达空载体(OE-control组)、YAP敲减(shYAP组)和敲减空载体(sh-control组),采用Western blot法检测肝组织YAP表达,采用CCK8和EdU实验评估YAP对肝祖细胞增殖能力的影响.结果 CDE造模组肝组织YAP蛋白表达比对照组增强,其YAP mRNA水平比对照组提高了2.45倍(P<0.01);CDE造模组肝组织胆管反应程度和肝祖细胞YAP表达显著高于对照组;EdU检测发现在相同培养条件下,YAP-OE组EdU阳性细胞比例较OE-control组显著增加[分别为(0.41±0.05)和(0.25±0.06),P<0.01],CCK8检测提示在培养72 h时YAP-OE组细胞增殖活性比OE-control组提高了1.78倍(P<0.01),而在相同培养条件下,EdU检测发现shYAP组EdU阳性细胞比例较sh-control组显著减少[分别为(0.25±0.04)和(0.13±0.02),P<0.01],在培养72h时CCK8检测提示shYAP组细胞增殖活性较sh-control组降低了1.92倍(P<0.01).结论 CDE饮食诱导小鼠慢性肝损伤导致肝组织胆管反应活跃的祖细胞YAP表达增强,YAP在体外能促进肝祖细胞增殖.
其他文献
Foot-and-mouth disease virus (FMDV), swine vesicular disease virus (SVDV) and classical swine fever virus (CSFV) all cause important animal diseases. FMDV affects many different cloven-hoofed animals, whereas SVDV and CSFV are restricted to domestic and f
Mink has been identified as an animal with susceptibility to SARS-CoV-2 and also as the only animal with evidence to transmit the virus back to humans. Thus, the surveillance of viruses among high-density farmed minks has a significant meaning for the con
In malaria-endemic regions, people often get exposed to various pathogens simultaneously, generating co-infection scenarios. In such scenarios, overlapping symptoms pose serious diagnostic challenges. The delayed diagnosis may lead to an increase in disea
目的 调查真实世界丙型肝炎病毒感染情况,并探讨应用索磷布韦/维帕他韦治疗慢性丙型肝炎(CHC)患者病毒学应答情况.方法 2017年9月～2019年9月行血清抗-HCV检测的3966例住院和门诊患者,应用索磷布韦/维帕他韦治疗CHC患者12 w.结果 在3966例患者中,检出血清抗-HCV阳性80例(2.0％);在80例抗-HCV阳性者中,同期进行了血清HCV RNA检测者42例,结果40例(95.2％)血清HCV RNA阳性;在40例CHC患者中,12例无明显症状和体征,18例有腹胀、乏力、纳差,10例有
目的 探讨无肝素化连续性肾脏替代疗法(CRRT)治疗肝硬化并肝性脑病(HE)患者的疗效以及血氨和细胞因子水平的变化.方法 2018年1月～2021年1月我院诊治的62例肝硬化并发HE患者,其中接受常规护肝和抗肝昏迷治疗31例(对照组),在此基础上接受无肝素化CRRT治疗31例(观察组).采用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和IL-10水平,采用谷氨酸脱氢酶法检测血氨水平.结果 观察组患者神志转清时间为(3.1±1.0)d,住院时间为(8.1±1.3)d,显著短于对
目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血丝氨酸蛋白酶抑制剂A1(SERPINA1)基因多态性变化.方法 2018年3月～2020年3月我院收治的PBC患者62例和同期健康体检者60例,采用基因测序法检测外周血SERPINA1基因rs28929474位点基因型,采用x2检验和哈迪-温伯格平衡检验SERPINA1基因rs28929474位点基因型和等位基因分布差异.结果 两组人群SERPINA1基因rs28929474位点基因型分布符合哈迪-温伯格平衡(P>0.05),具有群体代表性;PBC患者AA基
目的 探讨应用长效α-干扰素联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎(CHC)患者疗效及静息能量消耗和营养状态的变化.方法 2017年4月～2019年4月我院收治的CHC患者48例,采用随机数字表法分为观察组24例和对照组24例,分别给予聚乙二醇干扰素α-2a(peg-IFNα-2a)和利巴韦林治疗或干扰素α-2a(IFNα-2a)联合利巴韦林治疗48 w.测量静息能量消耗(REE)和预测静息能量消耗(pREE),常规检测血清前白蛋白(PA)和白蛋白(ALB)水平,计算体质指数(BMI).结果 在治疗48 w结束和随