【摘 要】
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建立了检测CSFV的快速、敏感、特异的RT-PCR ELISA方法.在RT-PCR过程中以地高辛标记的dUTP(DIG-dUTP)标记PCR产物,用生物素标记的捕获探针在链亲和素包被微量板孔中杂交捕获P
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建立了检测CSFV的快速、敏感、特异的RT-PCR ELISA方法.在RT-PCR过程中以地高辛标记的dUTP(DIG-dUTP)标记PCR产物,用生物素标记的捕获探针在链亲和素包被微量板孔中杂交捕获PCR产物.该方法的敏感性较常规RT-PCR方法高100倍,可检测出350μL 1∶100(相当于3.5mg)的兔脾组织悬液中的C株CSFV,特异性强,避免了PCR过程中因污染导致的假阳性结果.通过对RT-PCR和微量杂交系统的条件优化,该方法用于检测C株兔脾组织毒、细胞适应毒和野毒感染的猪组织毒样品,效果良好.
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