论文部分内容阅读
以莱芜猪心脏为供试材料，采用改进的异硫氰酸胍法提取心脏总RNA。通过SMART技术反转录合成全长cD—NA，经LD-PCR扩增后与pMD18-T载体连接并转化细菌DH5α，测定滴度和重组率，构建成菜芜猪心脏全长cDNA文库。经初步检测，原始文库的滴度为1．8×10^5 CFU／mL，重组率约为94．4％。从原始文库随机挑取13个单菌落过夜培养，提取质粒，经Hind Ⅲ和EcoRⅠ双酶切，凝胶电泳显示插入片段大小在0．3—2．0kb之间。