探讨沉默纤维介素2(FGL2)基因表达对急性坏死性胰腺炎(ANP)小鼠的治疗作用。
方法18只C57/BL小鼠按数字表法随机分为对照组、ANP组、携带靶向FGL2的siRNA腺病毒(Ad-FGL2-siRNA)组,每组6只。应用胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠法诱导ANP模型,Ad-FGL2-siRNA组在诱导ANP前尾静脉注射0.5 ml 4×108 pfu/ml的Ad-FGL2-siRNA。6 h后处死小鼠,收集胰腺组织及血液标本。胰腺组织行常规病理学检查,采用ELISA法检测血清TNF-α和IL-1β水平,RT-PCR、蛋白质印迹法及免疫组织化学染色法检测胰腺组织FGL2mRNA及蛋白表达,TUNEL法检测细胞凋亡。
结果对照组、ANP组、Ad-FGL2-siRNA组小鼠胰腺组织的病理评分分别为(1.33±0.21)、(9.17±0.98)、(6.26±0.52)分;血清TNF-α水平分别为(63.8±4.2)、(240.4±18.6)、(123.0±10.3)ng/L;IL-1β水平分别为(43.6±4.4)、(186.6±18.7)、(92.0±10.9)ng/L;胰腺组织FGL2 mRNA相对表达量分别为1.20±0.22、4.40±1.21、2.15±0.56;FGL2蛋白相对表达量分别为0.33±0.08、1.23±0.24、0.68±0.09;FGL2阳性细胞率为(2.56±0.31)%、(15.10±3.23)%、(8.68±1.81)%;细胞凋亡数为(4.51±1.21)、(35.81±4.11)、(11.79±3.02)个/200倍视野。ANP组较对照组均显著升高,Ad-FGL2-siRNA组较ANP组均显著下降,除FGL2 mRNA表达量外Ad-FGL2-siRNA组均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。
结论沉默FGL2基因表达可以减少炎症因子释放、抑制细胞凋亡从而减轻ANP小鼠胰腺组织损伤。