应用PCR-反向斑点杂交法快速检测和鉴定医学重要真菌

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目的建立一种以PCR为基础的的检测和鉴定医学重要真菌的方法.方法将白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌、都柏林念珠菌和新型隐球菌的种特异性探针加尾后固定于硝酸纤维素膜上;用标记生物素的真菌通用引物扩增经提取的各真菌DNA,与固定在膜上的探针杂交.结果所用的真菌通用引物可扩增12种临床常见的真菌DNA,扩增片段长度在350bp左右.8种特异性探针分别与上述真菌PCR扩增产物杂交,结果表明8种探针具有高度的特异性.通过39例临床标本和25例临床分离菌株的检测,PCR-反向杂
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