【摘 要】
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目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对人退变髓核细胞合成细胞外基质的影响及机制。方法取人腰椎退变髓核组织,进行髓核细胞的分离、培养、鉴定,取P3代细胞转至藻酸钙凝珠培养。
【基金项目】
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国家自然科学基金(81171751)
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目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对人退变髓核细胞合成细胞外基质的影响及机制。方法取人腰椎退变髓核组织,进行髓核细胞的分离、培养、鉴定,取P3代细胞转至藻酸钙凝珠培养。实验分组如下:LIPUS组:超声刺激1周,20 min/d;对照组:不予超声刺激同条件培养1周;LY294002组:超声刺激并加入LY294002共培养1周。应用ELISA法检测上清中髓核细胞分泌的aggrecan和Ⅱ型胶原(Col2α1);RT-PCR法检测细胞中aggrecan和Col2α1在mRNA水平的表达差异;Western blot法检测细胞中aggrecan、Col2α1、Akt及p-Akt的表达差异。结果予以LIPUS刺激后,上清中的aggrecan和Col2α1浓度较对照组升高(P<0.05),细胞内aggrecan和Col2α1在mRNA及蛋白水平的表达与对照组比较均有增高(P<0.05),Akt的表达无明显变化(P>0.05),p-Akt的表达增高(P<0.05),加入特异性抑制剂LY294002后,aggrecan和Col2α1的合成明显降低(P<0.05)。结论低强度脉冲超声能通过PI3K/Akt信号通路促进藻酸钙凝珠立体培养的人退变髓核细胞合成细胞外基质。
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