【摘 要】
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帕金森病(PD)大鼠脑微透析液中左旋多巴(L-DOPA)和多巴胺(DA)的高灵敏检测技术,是PD相关的临床医学及L-DOPA减毒增效协同药物筛选必不可少的手段。采用d0/d3-10-甲基-吖啶酮-
【机 构】
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莱芜职业技术学院化工教研室,山东省生命有机分析重点实验室,中国科学院西北高原生物研究所
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帕金森病(PD)大鼠脑微透析液中左旋多巴(L-DOPA)和多巴胺(DA)的高灵敏检测技术,是PD相关的临床医学及L-DOPA减毒增效协同药物筛选必不可少的手段。采用d0/d3-10-甲基-吖啶酮-2-磺酰氯(d0/d3-MASC)作为稳定同位素编码衍生试剂,联合超声波辅助-分散液液微萃取(UA-DLLME)技术,建立并验证了超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)快速检测L-DOPA和DA的分析方法。分别使用d0-MASC和d3-MASC衍生微透析液样品和混合对照品,将衍生溶液混合后采用UA-DLLME技术富集净化,继而进行UHPLC-MS/MS检测(多反应监测模式),以d3-MASC衍生物作为d0-MASC衍生物的内标物进行定量。实验表明,在乙腈/水(pH 10.8碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液)溶液中37℃下反应3.0 min后衍生化反应完成,梯度洗脱条件下2.0 min可完成分离检测,线性范围为0.20~1 500.0 nmol/L,相关系数大于0.994,L-DOPA和DA的检出限(S/N=3)分别为0.005和0.009nmol/L。分析方法评价结果良好,与已报道方法相比在灵敏度、分析速度和抗基质干扰等方面具有优势,本方法已成功应用于测定中药方剂首乌方对PD大鼠脑微透析液中L-DOPA和DA浓度波动的影响。
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