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以叔丁醇为有机溶剂，采用固定化脂肪酶Novozym435催化棉籽油与碳酸二甲酯进行酯交换反应制备了生物柴油，考察了加水量、碳酸二甲酯与棉籽油的摩尔比、反应温度、反应时间、搅拌转速、Novozym435用量（基于棉籽油的质量分数）和叔丁醇与碳酸二甲酯的体积比对脂肪酸甲酯收率的影响，以及Novozym435的重复使用性能。实验结果表明，在碳酸二甲酯与棉籽油的摩尔比为4、叔丁醇与碳酸二甲酯体积比为1．5、Novozym435用量（基于棉籽油的质量分数）12．5％、反应温度50℃、反应时间24h、搅拌转速160r