【摘 要】
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目的 建立简易的可视化环介导等温扩增(LAMP)检测转基因作物的方法.方法 通过一对特异的能识别一段正义链和一段反义链的内引物和一对链置换引物,在Bst DNA聚合酶作用下,以等
【机 构】
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广州华峰生物科技有限公司,广州,510663广州华峰生物科技有限公司,广州 510663;华南理工大学生物科学与工程学院,广州 510006;
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目的 建立简易的可视化环介导等温扩增(LAMP)检测转基因作物的方法.方法 通过一对特异的能识别一段正义链和一段反义链的内引物和一对链置换引物,在Bst DNA聚合酶作用下,以等温条件实现对外源转基因成分的扩增,反应液和高浓度的显色液SYBR GREEN I同时置于特殊设计的反应管中,反应后可实现闭管可视化检测.结果 对转基因作物中常见的外源基因元件胭脂碱合成酶终止子(T-NOS)和烟草花叶病毒35S启动子(P-CaMV35S)进行了LAMP检测.T-NOS LAMP对大米品系BT63,玉米品系BT11,MON810,大豆品系GTS40-3-2的检测结果呈阳性,P-CaMV35S LAMP对大米品系BT63,玉米品系BT11,MON810,MON863,大豆品系GTS40-3-2的检测结果呈阳性,二者对非转基因大米,玉米,大豆的检测结果均呈阴性.上述结果表明,本文中建立的T-NOS和P-CaMV35S LAMP检测方法特异性高.另外,通过对大豆品系GTS40-3-2模拟样品的检测,证明T-NOS LAMP能检出转基因成分含量为0.5％的样品,P-CaMV35S LAMP能检出转基因成分含量为0.1％的样品,检测灵敏度较高.结论 改良LAMP法灵敏度高,特异性好,能用于快速初筛转基因作物.
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