【摘 要】
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目的 制备牛坏死杆菌43KOMP单克隆抗体,并鉴定其生物学特性.方法 经IPTG诱导表达重组43KOMP,纯化后免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选分泌抗43K OMP特异性抗
【机 构】
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黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆163319
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目的 制备牛坏死杆菌43KOMP单克隆抗体,并鉴定其生物学特性.方法 经IPTG诱导表达重组43KOMP,纯化后免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选分泌抗43K OMP特异性抗体的杂交瘤细胞,制备腹水,对抗43K OMP单克隆抗体进行效价、亚类、免疫原性及特异性鉴定.结果 获得3株稳定表达抗43K OMP单克隆抗体的杂交瘤细胞株,取其中效价最高的1 株命名为043,其重链为IgG1,轻链为κ链,上清和腹水效价分别为1∶25 600和1∶105;该单克隆抗体可与重组43K OMP发生特异性反应,且与转染后瞬时表达43K OMP 的BHK-21细胞特异性结合,发生荧光反应.结论 成功表达并纯化了 43KOMP,制备了牛坏死杆菌43KOMP单克隆抗体,为研究坏死杆菌的感染机制及发病机理奠定了基础.
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