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目的:设计以 Rap1b 基因为靶点的短发夹状 RNA(shRNA),构建重组慢病毒表达载体并转染食管鳞癌细胞,观察其在食管鳞癌细胞中的表达。方法:应用重组 DNA 技术,将设计好的4条基因特异性 shRNA 序列插至慢病毒表达载体 pGLV3- GFP 中,构建 pGLV3- GFP - Rap1b - shRNA1/2/3/4。并应用脂质体法转染293T 细胞,进行病毒包装及滴度测定。采用实时荧光定量 PCR(RT - PCR)及 Western blot 分别从 mRNA 和蛋白水平检测转染食管鳞癌