【摘 要】
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目的：构建Rabex-5 RNAi慢病毒表达载体,并转染人乳腺癌细胞株MCF-7,观察其对Rabex-5基因的沉默效应。方法：将设计合成的单链引物退火成双链oligo序列,连接入经AgeⅠ和EcoRⅠ双
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科
【基金项目】
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重庆市教委基金资助项目（编号：KJ100317）
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目的：构建Rabex-5 RNAi慢病毒表达载体,并转染人乳腺癌细胞株MCF-7,观察其对Rabex-5基因的沉默效应。方法：将设计合成的单链引物退火成双链oligo序列,连接入经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化的pMAGic慢病毒质粒载体中,经转化DH5α感受态细胞并筛选出阳性克隆,测序鉴定。用293FT细胞包装产生慢病毒,感染MCF-7细胞,利用Real-time PCR和Western blot鉴定抑制Rabex-5表达的效果。结果：PCR与测序鉴定证实成功构建了Rabex-5 RNAi的慢病毒载体
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