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【目的】构建Pseudomonas putida ND6中双拷贝萘降解调控基因nahR突变株,初步探讨ND6菌株的萘降解调控模式。【方法】扩增nahR基因的上下游同源片段及卡那霉素抗性基因Km;利用重叠延伸PCR技术将这三个片段连接起来,然后将其克隆到自杀性载体pEXl8To,得到同源重组载体pEX18Te-RKm;采用热激法将同源重组载体pEX18Tc-RKm转化到供体菌Escheria coil S17-I,再利用接合转移的方法将供体菌中的载体转到受体细菌ND6菌株,通过同源重组敲除nahR基因,对突