MTA1转基因小鼠的构建及鉴定

来源 :中国比较医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jasn114

【摘要】

：

目的将人的MTAl外源基因整合到C57BL／6J小鼠中，构建稳定高表达MTAl的小鼠模型。方法通过RT—PCR方法克隆人的MTAl编码序列，将MTAl插入真核表达载体pcDNA3．1构建pcDNA3．1-MTAl载体，

【作者】

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薛洪省王海娟刘健张丽林晨詹启敏赵志龙钱海利

【机构】

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大连大学附属中山医院胸心外科,中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室,中国医学科学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室

【出处】

：

中国比较医学杂志

【发表日期】

：

2013年9期

【关键词】

：

MTA1 转基因构建鉴定 MTA1 Transgenic Establishment Identification

【基金项目】

：

国家自然基金项目（81071773、81101518）,分子肿瘤学国家重点实验室自主课题（SKL-2013-12）.

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目的将人的MTAl外源基因整合到C57BL／6J小鼠中，构建稳定高表达MTAl的小鼠模型。方法通过RT—PCR方法克隆人的MTAl编码序列，将MTAl插入真核表达载体pcDNA3．1构建pcDNA3．1-MTAl载体，回收片段后利用显微注射技术将目的基因片段注入到受精卵的雄原核中，使用MTAl特异性的引物经PCR鉴定出基因型阳性的转基因小鼠，再利用Western—blot及免疫组化方法检测MTAl在转基因小鼠全身级织表达情况。结果成功构建了MTAl转基因注射片段。在320枚显微注射受精卵中挑选出300枚存

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