【摘 要】
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目的观察来氟米特活性代谢物teriflunomide联合甲氨蝶呤对体外培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖及其破骨细胞分化因子表达的影响。方法滑膜组织分离培养滑膜成纤维
【基金项目】
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南京市卫生局医学科技发展项目(ZKX08022,YKK11101);江苏省六大人才高峰计划项目(2010-057);南京市鼓楼医院青年启动项目(QJ2012020)
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目的观察来氟米特活性代谢物teriflunomide联合甲氨蝶呤对体外培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖及其破骨细胞分化因子表达的影响。方法滑膜组织分离培养滑膜成纤维细胞,加入不同浓度药液,使得终浓度分别为0.1,0.01,0.001 mg.mL-1 teriflunomide,0.1,0.01,0.001 mg.mL-1甲氨蝶呤,0.1 mg.mL-1 teriflunomide+0.1 mg.mL-1甲氨蝶呤,0.01 mg.mL-1 teriflunomide+0.01 mg.mL-1甲氨蝶呤,0.001 mg.mL-1 teriflunomide+0.001 mg.mL-1甲氨蝶呤,每组重复3个复孔,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物对细胞增殖的影响;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测药物对滑膜成纤维细胞核因子-κB(NF-κB)受体活化因子配体、骨保护素mRNA表达水平的影响。结果与对照组比较,药物处理后滑膜成纤维细胞的吸光度(A)值均有所降低,与单独用药组比较,0.1 mg.mL-1teriflunomide联合0.1 mg.mL-1甲氨蝶呤组A值降低最为显著(P<0.05),且该处理组骨保护素mRNA表达升高,NF-κB受体活化因子配体mRNA表达降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论来氟米特活性代谢物teriflunomide与甲氨蝶呤联合能够协同抑制滑膜成纤维细胞增殖,调节骨破坏相关基因表达,这可能是来氟米特与甲氨蝶呤联用治疗类风湿性关节炎的机制之一。
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