我国慢性乙型肝炎及肝癌患者中乙型肝炎病毒核心基因内缺失突变株的研究

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目的 研究乙型肝炎( 乙肝) 病毒核心基因内缺失突变株( C I D) 在慢性乙肝及肝癌患者中存在的状态及意义。方法 提取标本 D N A 作 Southern 印迹及杂交,或用 P C R 扩增核心基因,分析片段大小,部分作克隆及测定。结果 35 例慢性乙肝患者血清中30 例(85 % ) 核心基因为阳性。30例中3 例(10 % ) 除有正常大小片段外,还有相对小分子质量片段。15 例肝癌患者肝癌组织 P C R C 基因阳性为9 例(60 % ) ,未见小片段。肝癌组织中2 份存在 C I D(2/9 ,22 % ) 。克隆测序证明有大小不等的缺失突变,自6 ~324 个核苷酸不等的符合框架的缺失,位于 C 基因的中段。结论 我国慢性乙肝患者中 C I D 株阳性率仅10 % ,不是构成我国多数乙肝患者持续性病毒感染的主要原因。肝癌组织中 C I D 的阳性率高于乙肝患者血清的阳性率, C I D 在肝癌中的作用值得进一步研究。 Objective To study the status and significance of C I D deletion in hepatitis B virus (HBV) core gene in patients with chronic hepatitis B and liver cancer. METHODS: Southern blotting and hybridization were performed on samples of D N A, or the core genes were amplified by PCR. The size of the fragments was analyzed, and some were cloned and assayed. Results Thirty (85%) sera from 35 patients with chronic hepatitis B had positive core gene. Three of the 30 patients (10%) had relatively small molecular weight fragments in addition to normal size fragments. There were 9 cases (60%) of P C R C gene positive in HCC from 15 cases of hepatocellular carcinoma, no small fragment was found. Two of the liver cancer tissues had C I D (2/9, 22%). Cloning and sequencing showed that there were deletion mutations ranging in size from 6 to 324 nucleotides consistent with the lack of frame, located in the middle of the C gene. Conclusion The positive rate of C I D strain in chronic hepatitis B patients is only 10% in our country, which is not the main cause of persistent viral infection in most hepatitis B patients in our country. The positive rate of C I D in HCC was higher than that in patients with hepatitis B, and the role of C I D in HCC deserved further study.
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