【摘 要】
：
目的设计、构建SV40病毒T抗原真核表达载体,并导入真核细胞进行表达鉴定。方法采用重叠延伸拼接法,从pUC19-SV40载体中亚克隆切除内含子的SV40病毒T抗原基因全长片段,EcoRⅠ/
【基金项目】
：
国家自然科学基金资助(30371299)
论文部分内容阅读
目的设计、构建SV40病毒T抗原真核表达载体,并导入真核细胞进行表达鉴定。方法采用重叠延伸拼接法,从pUC19-SV40载体中亚克隆切除内含子的SV40病毒T抗原基因全长片段,EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后定向克隆至pEGFP-N1真核表达载体上,酶切鉴定重组质粒;用脂质体转染的方法将构建的载体导入原代培养的正常人成纤维细胞进行表达,检测SV40病毒T抗原基因在成纤维细胞内的表达。结果SV40病毒T抗原基因成功克隆至pEGFP-N1真核表达载体中;转染成纤维细胞提取基因组DNA及总RNA,分别经PCR和RT-PCR反应扩增出288 bp的特异性片段。结论本试验构建的SV40病毒T抗原重组质粒为利用SV40T抗原进行真核细胞研究提供了稳定、可靠的分子工具。
其他文献
目的了解医源性腹泻患者肠道菌群失调原因菌的耐药性,为临床治疗不同原因菌引起的Ⅲ度肠道菌群失调及内源性感染提供选药依据。方法用VITEK-ATB系统对该院2001~2003年间医源
圆桌主持 陈宏光$$ 本期嘉宾$$ 上海中夏旭波律师事务所 李晓茂$$ 上海广庭律师事务所 潘轶$$ 上海卓君律师事务所 秦建铭$$ 主持人
目的:探讨慢性酒精摄入对肝组织病理学改变的影响及上皮-间充质转化对肝纤维化形成的作用。方法:将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组灌胃给予与酒精组等体积的蒸馏水,
"一带一路"背景下境外国有企业腐败呈现目无组织,目无群众;"一把手"涉案较多;贪腐"窝案"、"串案"较多;贪腐涉案金额巨大;家族化贪腐较多,权色交易较多;"59岁现象"严重等特点
针对农村小学生生活单一,缺少丰富的生活体验这一现象,可将游戏情景作文教学引入到课堂中,学生在教师精心设计的游戏中边观察边记录,充分体验游戏带来的真实感受,从而积累大
利用南京市第五次、第六次人口普查数据研究南京都市区2000~2010年人口空间变动及其规律。研究发现,1 10 a间南京都市区各地域人口均呈现增长态势,近郊区成为人口增长最为剧
本文从马克思主义的理论视角对全球化这一现象作了历史的溯源和新的阐释 ,并对全球化语境下的文化身份问题做进一步的分析。在此基础上 ,作者结合全球化进程中中国文化和文学
有效跨文化传播力是文化软实力资源软实力化的重要保障。以博物馆为例,作为对外传播把关人之一的译者可以灵活运用解码策略,保证文化传播信道的明晰性、顺畅性和饱满性,以期
以具有机电耦合效应的磁性粒子浓悬浮溶液体系为例 ,讨论微米级粒子在悬浮体系中的沉降稳定性及其表征方法 .实验结果表明 ,在微米级磁性粒子浓悬浮体系中加入一定量纳米粒子