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本试验克隆、表达了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的E2蛋白,以表达纯化后的E2蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件建立了间接ELISA检测法。确定该方法的阴阳判定临界值为0.33,抗原包被浓度为8μg/mL,一抗的最佳稀释度为1∶100,10%PEG4000为最佳封闭液,酶标二抗最佳稀释度为1∶6000。用建立的ELISA检测方法和IDEXX ELISA抗体检测试剂盒检测180份血清临床样品,总符合率为95%。该方法的建立为进一步研制BVDV ELISA检测试剂盒奠定了基础。