犬瘟热荧光抗体技术的应用研究

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heyifeizhu
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用硫酸铵盐析法和蔗糖梯度离心法,从犬瘟热病毒人工感染犬的肝、脾中浓缩提纯犬瘟热病毒,以其免疫家兔,制备兔抗犬瘟热病毒免疫血清,再经硫酸铵沉淀与QAE-葡聚糖凝胶A50层析提取IgG,于4℃低速搅拌标记异硫氰酸荧光素,制成兔抗犬瘟热病毒抗原荧光抗体。用上述荧光抗体检测21只犬瘟热病毒人工感染犬和35只自然感染犬的116份白细胞,抗原阳性109份,而健康犬、传染性肝炎犬、犬细小病毒肠炎犬的37份血液白细胞,全部为抗原阴性。另外,用同样染色法检查了25份犬瘟热死亡犬脾细胞涂片,有23份为抗原阳性;而健康犬、传染性肝炎犬和犬细小病毒肠炎犬的17份脾细胞涂片无一为抗原阳性。对141份犬瘟热病犬标本,用电镜或病毒分离证明为犬瘟热病毒抗原阳性的有138份,直接FA染色法检查也为抗原阳性的有132份,敏感性为95.7%;经电镜检查或病毒分离证明为抗原阴性的57份标本,直接FA染色检查全部为阴性,特异性为100%。用直接FA染色法和以细胞病变(CPE)为感染指标的TCID50检测法对35份犬瘟热病毒鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物的毒力进行检测,结果分别平均为4.85和4.72log10/0.1mL但直接FA染色法比CPE客观?
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