【摘 要】
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目的 研究在2-甲氧雌二醇(2-ME)诱导SK-N-MC尤文肉瘤细胞凋亡的过程中,调控细胞活性氧水平(ROS)的环节及ROS引发的下游事件.方法 利用流式细胞仪、clark氧电极等手段及撤药实验、线粒体通透性转换(PT)孔干预等方法检测2-ME作用下凋亡的可逆性及呼吸链活性、线粒体跨膜电势(△ψm)、细胞ROS水平等参数的变化,并考察它们之间的关系.结果 2-ME诱导SK-N-MC细胞发生依赖于R
【机 构】
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030001,太原,山西医科大学第二医院骨科,山西省肿瘤医院预防保健科,山西省肿瘤医院预防保健科,山西省肿瘤医院预防保健科,030001,太原,山西医科大学第二医院骨科,030001,太原,山西医科大
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目的 研究在2-甲氧雌二醇(2-ME)诱导SK-N-MC尤文肉瘤细胞凋亡的过程中,调控细胞活性氧水平(ROS)的环节及ROS引发的下游事件.方法 利用流式细胞仪、clark氧电极等手段及撤药实验、线粒体通透性转换(PT)孔干预等方法检测2-ME作用下凋亡的可逆性及呼吸链活性、线粒体跨膜电势(△ψm)、细胞ROS水平等参数的变化,并考察它们之间的关系.结果 2-ME诱导SK-N-MC细胞发生依赖于ROS的细胞凋亡.2-ME作用3 h内撤药,至24 h无明显凋亡发生;3 h后撤药,至24 h有明显凋亡.2-ME作用下,线粒体呼吸链活性被抑制,ROS生成加速;△ψm经历"升高-降低"变化,3h时开始降低,PT孔稳定剂可维持△ψm不降低;ROS水平持续升高,3 h时有跳跃性增高,PT孔稳定剂对ROS升高趋势无明显影响.结论 2-ME作用引起SK-N-MC细胞呼吸链的抑制,引发△ψm的升高,由此造成ROS生成加速及ROS水平升高.当ROS水平突破一定阈值,引发了PT孔的不可逆开放及△ψm的消解乃至崩溃,并最终使细胞走向凋亡.ROS是2-ME诱导凋亡信号传导中的一个环节。
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