【摘 要】
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目的构建包装分泌型人内皮抑素(Endostatin)基因过表达慢病毒并表达。方法人工合成含人胰岛素信号肽和人Endostatin基因序列,利用pLVX-mCMV-ZsGreen载体质粒,构建慢病毒pLVX-
【机 构】
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广西壮族自治区人民医院外科,广西壮族自治区人民医院病理科,广西医科大学医学实验中心
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目的构建包装分泌型人内皮抑素(Endostatin)基因过表达慢病毒并表达。方法人工合成含人胰岛素信号肽和人Endostatin基因序列,利用pLVX-mCMV-ZsGreen载体质粒,构建慢病毒pLVX-hEndostatin-mCMV-ZsGreen质粒,通过293细胞包装制备慢病毒。利用重组慢病毒,转染肝干细胞,筛选胞外表达分泌型Endostatin的肝干细胞,观察其能否稳定表达。结果成功构建pLVX-hEndostatin-mCMV-ZsGreen,酶切鉴定及测序正确;该载体可通过293细胞包装慢病毒,该病毒携带人胰岛素信号肽和Endostatin基因序列,在肝干细胞中稳定表达分泌。ELISA检测Endostatin表达水平为18.58～34.20 ng/ml。结论分泌型人Endostatin基因过表达慢病毒成功制备并表达,可用于肿瘤血管生成相关实验。
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