【摘 要】
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目的 构建pcDNA3.1/NT-GFP小凹蛋白1及对突变体表达载体及表达蛋白生物活性进行分析.方法 采用硫化修饰引物与Pfu酶结合的高度保真性聚合酶链反应体系,自行设计多对引物,分别
【机 构】
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南华大学药物药理研究所,南华大学药物药理研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金，湖南省自然科学基金
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目的 构建pcDNA3.1/NT-GFP小凹蛋白1及对突变体表达载体及表达蛋白生物活性进行分析.方法 采用硫化修饰引物与Pfu酶结合的高度保真性聚合酶链反应体系,自行设计多对引物,分别扩增带His标签的小凹蛋白1全长目的片段、小凹蛋白1(缺失81～101位氨基酸)突变体1片段及小凹蛋白1(缺失143～156位氨基酸)突变体2片段;分别亚克隆入pcDNA3.1/NT-GFP-TOPO真核表达载体,转化TOP10 E.coli大肠杆菌,在含氨苄的固体LB培养基上随机挑取6个克隆,分别提取质粒后,用PCR法筛选
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