【摘 要】
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Cox4是电子传递链上复合体Ⅳ的1个关键亚基,实现Cox4的高效表达以及制备其抗体,对于线粒体功能研究至关重要。根据裂殖酵母序列信息数据库(S.pombe_GeneDB)中cox4的基因序列(
【基金项目】
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国家自然科学基金(编号:31400032),江苏省高校自然科学研究项目(编号:13KJB180010)
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Cox4是电子传递链上复合体Ⅳ的1个关键亚基,实现Cox4的高效表达以及制备其抗体,对于线粒体功能研究至关重要。根据裂殖酵母序列信息数据库(S.pombe_GeneDB)中cox4的基因序列(登录号:SPAC1296.02)设计引物,以粟酒裂殖酵母的cDNA序列为模板,通过PCR扩增技术得到目标蛋白的基因,然后通过克隆构建到含有T7强启动子的表达载体pET-28a(+)上,并将其转入大肠杆菌BL21(Escherichia coli BL21)中实现重组工程菌株的构建。结果表明,通过一系列条件优化实现了对
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