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以中性乳糖酶生产菌脆壁克鲁维酵母为材料，构建以kan基因为筛选标记、以脆壁克鲁维酵母乳糖酶基因上游调控区为同源臂的质粒pPkan。将质粒pPkan电击转化脆壁克鲁维酵母，对受体菌生长时期、电场强度、电击后培养时间等条件进行优化。结果表明，以OD600为0．8的脆壁克鲁维酵母为受体、电压1．5kv、电场强度为7．5kV·cm-1、电击后培养时间为90min，可获得较高的转化率，最高转化效率为2．37×10^2转化子·ugDNA。在电击转化的同时加入限制性内切酶10uL，对电击转