【摘 要】
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目的 探讨宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移和侵袭的影响及Wnt/β-catenin信号通路机制.方法 采用胎牛血清派样HeLa细胞,使用胰蛋白酶消化后培养上清液,离心后磷酸盐缓冲液沉
【机 构】
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辽宁省大连市妇幼保健院妇产科,大连 116000
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目的 探讨宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移和侵袭的影响及Wnt/β-catenin信号通路机制.方法 采用胎牛血清派样HeLa细胞,使用胰蛋白酶消化后培养上清液,离心后磷酸盐缓冲液沉淀,得到HeLa细胞外泌体.电镜观察外泌体形态表现,Western blottig检测外泌体内蛋白表达情况.检测细胞侵袭能力和迁移能力,检测Wnt/β-catenin信号通路中蛋白表达水平.结果 使用透射电镜观察可发现,细胞上清液中有直径为40～100nm、圆形及椭圆形的囊泡状小体,检测后可在其内部发现大量CD63和CD81蛋白,说明HeLa细胞内物质为外泌体.使用荧光标记HeLa细胞外泌体,培养24h后,使用聚焦荧光显微镜观察,对照组无标记外分泌附着,研究组有标记外分泌附着.研究组HeLa细胞侵袭数多于对照组,HeLa细胞迁移距离长于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).研究组蛋白Wnt1、β-catenin和TCF4表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 宫颈癌HeLa细胞外泌体能增强肿瘤细胞迁移和侵袭,调控增强Wnt/β-catenin信号通路中蛋白表达.
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