【摘 要】
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目的:观察不同剂量的血小板源生长因子BB刺激对血管平滑肌细胞生长率的影响及血管平滑肌细胞不同增殖程度下p27和p57蛋白表达量的变化.方法:实验于1998-09/2000-05在南方医科
【机 构】
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解放军第二五二医院心内二科,解放军第二五二医院神经内科,南方医科大学附属南方医院心内科,解放军第二五二医院传染科,河北省职工医学院附属医院肾内科
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目的:观察不同剂量的血小板源生长因子BB刺激对血管平滑肌细胞生长率的影响及血管平滑肌细胞不同增殖程度下p27和p57蛋白表达量的变化.方法:实验于1998-09/2000-05在南方医科大学附属南方医院心内科实验室完成.①选用七八周雄性SD大鼠80只,体外分离SD大鼠主动脉中层平滑肌,贴壁法培养平滑肌细胞,选用2～4代培养的细胞.②胰酶消化的血管平滑肌细胞,浓度为1×108 L-1,分别接种子6孔板上,无血清的培养基静止48 h,分别加入血小板源生长因子BB10和20μg/L,无血清的培养基为对照组,分别在刺激1,3,5 d后,计算不同剂量的血小板源生长因子BB刺激下的血管平滑肌细胞数量,每组重复4次,取平均值.③在用血小板源生长因子BB10和20μg/L刺激6,12,24 h后收集细胞,用免疫印迹分析法检测细胞中p27和p57蛋白表达量.结果:①血管平滑肌细胞数量:血小板源生长因子BB刺激1和3及5 d后血小板源生长因子BB 10和20μg/L组明显高于对照组(t=4.06～21.76,P＜0.05～0.01).②血管平滑肌细胞中p27蛋白表达量(A值):血小板源生长因子BB刺激12和24 h后血小板源生长因子BB 10和20μg/L组明显低于对照组(P＜0.05,0.01),血小板源生长因子BB 20μg/L组明显低于血小板源生长因子BB 10μg/L组(P＜0.01).p57蛋白表达量(A值):血小板源生长因子BB刺激24 h后血小板源生长因子BB 10和20μg/L组明显高于对照组(P＜0.01),血小板源生长因子BB 20μg/L组明显高于血小板源生长因子BB 10μg/L组(P＜0.01).结论:①在血小板源生长因子BB刺激的血管平滑肌细胞增殖过程中,p27和p57蛋白表达量变化不同.②在增殖的血管平滑肌细胞中随刺激因子作用时间的延长,表达量逐渐下降,而p57蛋白表达水平随血管平滑肌细胞的增殖而增加,p27蛋白表达量的变化可能是决定血管平滑肌细胞增殖的关键因素.
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