玉米基因转化的离体子房注射及其转基因植株的鉴定

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用微量注射法对玉米(Zea mays L.)进行基因转化已获得成功, 但这种方法是在田间进行的,污染较大, 操作时劳动强度大,转化率低,而且受气温影响,气温下降则种子不能成熟.采用离体注射培养法,取下授粉24 h后的玉米雌穗,剥去苞叶,在超净工作台进行微量注射,然后切成小块放在培养瓶中,在光照培养箱内培养,3~4周可直接获得种子.这种方法克服了非离体培养的缺点,提高了转化效率.种子萌发后进行植株抗性筛选和分子检测, 得到了具抗性的、PCR 和Southern杂交结果均为阳性的转基因植株.
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