【摘 要】
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目的 探究双氯芬酸钠对骨关节炎(OA)大鼠模型软骨细胞炎症和滑膜巨噬细胞极化的影响.方法 45只6周龄雄性Sprague-Dawley大鼠用于本研究,大鼠左膝关节的髌韧带关节内注射单碘乙酸(MIA)溶液诱导OA模型.根据实验目的将实验大鼠分为3组:对照组(关节内注射无菌0.9％氯化钠溶液作为实验对照,n=15),OA模型组(大鼠左膝关节的髌韧带关节内注射MIA诱导OA模型,n=15),双氯芬酸钠组(MIA注射后14 d,用双氯芬酸钠口服治疗8 d,n=15).通过酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测大
【机 构】
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大连市第二人民医院骨科 辽宁 大连 116011;大连机车医院骨科 辽宁 大连 116021
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目的 探究双氯芬酸钠对骨关节炎(OA)大鼠模型软骨细胞炎症和滑膜巨噬细胞极化的影响.方法 45只6周龄雄性Sprague-Dawley大鼠用于本研究,大鼠左膝关节的髌韧带关节内注射单碘乙酸(MIA)溶液诱导OA模型.根据实验目的将实验大鼠分为3组:对照组(关节内注射无菌0.9％氯化钠溶液作为实验对照,n=15),OA模型组(大鼠左膝关节的髌韧带关节内注射MIA诱导OA模型,n=15),双氯芬酸钠组(MIA注射后14 d,用双氯芬酸钠口服治疗8 d,n=15).通过酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测大鼠血清炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-12和IL-10浓度.使用相应试剂盒测定大鼠血清丙二醛、还原型谷胱甘肽(GSH)和过氧化物歧化酶(SOD)浓度.通过蛋白印迹分析炎症介质相关蛋白的表达.通过免疫组织化学分析检测CD86和Arg1的蛋白表达.通过免疫细胞化学测定检查大鼠滑膜组织中CD86+和CD163+巨噬细胞的数量.组织学和免疫组织化学分析大鼠关节组织.通过膝弯曲试验和步态分析得分评估各组大鼠的关节疼痛.结果 OA模型组TNF-α、IL-1β、IL-12浓度较对照组升高,IL-10浓度较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05);双氯芬酸钠组TNF-α、IL-1β、IL-12较OA模型组降低,IL-10浓度较OA模型组升高,差异均有统计学意义(P<0.05).OA模型组丙二醛浓度较对照组升高,GSH和SOD浓度较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05);双氯芬酸钠组丙二醛浓度OA模型组降低,GSH和SOD浓度较OA模型组升高,差异均有统计学意义(P<0.05).OA模型组iNOS、COX2、MMP-13和PGE2蛋白表达较对照组升高,差异均有统计学意义(P<0.05);双氯芬酸钠组iNOS、COX2、MMP-13和PGE2蛋白表达较OA模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.05).OA模型组CD163蛋白表达较OA模型组升高,Arg1蛋白表达较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05);双氯芬酸钠组CD163蛋白表达较OA模型组降低,Arg1蛋白表达较OA模型组升高,差异均有统计学意义(P<0.05).OA模型组CD86+、CD163+巨噬细胞的数量和M1/M2比值较对照组升高,差异均有统计学意义(P<0.05);双氯芬酸钠组CD86+、CD163+巨噬细胞的数量和M1/M2比值较OA模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.05).OA模型组的膝关节弯曲和步态评分较对照组升高,差异均有统计学意义(P<0.05);双氯芬酸钠组膝关节弯曲和步态评分较OA模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 双氯芬酸钠通过促进M2巨噬细胞极化减轻MIA诱导的OA大鼠的疼痛和软骨退化.双氯芬酸钠通过应用于膝关节腔后,M2巨噬细胞促进了膝关节的抗炎微环境,有助于结构改善和镇痛作用.
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