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摘 要 采用正交和单因素试验方法研究了添加不同剂量的α-淀粉酶、纤维素酶、果胶酶及酸性蛋白酶外源酶制剂对烟叶醇化常规化学成分的影响。结果发现，组合添加外源酶制剂对常规化学成分影响不显著，单一添加酶制剂可以有针对性地调节烟叶化学成分的变化。
关键词 烟叶；外源酶制剂；烟叶醇化；常规化学成分；影响
中图分类号：S572 文献标志码：A 文章编号：1673-890X（2014）03-112-2
1 试验材料
2010年湖南郴州片烟，云87品种，等级B2FA，每个处理烟丝重量100 g。酶活度如下：纤维素酶30 μ/mg，酸性蛋白酶50 μ/mg，果胶酶30 u/mg，α-淀粉酶200 000 μ/mg。
2 试验方法
2.1 试验设计
先将样品在22±1℃，60%±2%相对湿度下平衡72 h。然后采用正交试验设计，用果胶酶、淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶处理，同时设置对照样品，恒温恒湿进行平衡，温度50±1℃，相对湿度60%±2%，处理时间5 h。另设计果胶酶、淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶单一处理，添加量分别为0.6 g、0.4 g、0.5 g、0.6 g。所有样品处理结束后将样品放在烘箱内80±1℃灭活2 h。
2.2 常规化学成分检测
化学成分检测按相关标准进行，主要检测烟碱、总糖、还原糖、总氮、总钾及总氯，并和对照样进行对比。
2.3 数据分析处理
所有检测结果均采用spss13.0进行统计分析，分析发现，纤维素酶对各个指标的影响均不显著，因此，最后的方差分析中，均将纤维素酶因素当着试验误差进行处理，不参与方差分析。
3 试验结果
3.1 酶制剂对烟叶常规化学成分影响
样品0-9号分别为：烟碱（%）3.47、3.42、3.33、3.32、3.33、3.33、3.37、3.33、3.35、3.32；总糖（%）22.44、21.21、22.53、21.46、22.35、21.61、22.61、22.31、22.32、22.45；还原糖（%）20.23、19.30、20.28、19.24、20.15、19.67、20.38、20.01、20.03、20.37；总氯（%）0.41、0.69、0.80、0.95、0.92、0.68、0.81、0.79.、0.94、0.65；总钾（%）2.39、2.41、2.34、2.35、2.36、2.42、2.37、2.42、2.40、2.40；总氮（%）1.94、1.97、1.94、2.09、2.08、2.10、1.94、2.21、2.24、2.12。
3.2 单一酶制剂处理对烟叶化学成分影响
对照处理总糖（%）22.44、还原糖（%）20.23、果胶（%）9.03、淀粉（%）4.01；果胶酶处理总糖（%）21.82、还原糖（%）19.08、果胶（%）9.11、淀粉（%）3.70；淀粉酶处理总糖（%）21.98、还原糖（%）20.02、果胶（%）8.97、淀粉（%）3.77；蛋白酶处理总糖（%）22.29、还原糖（%）20.20、果胶（%）9.49、淀粉（%）3.65；纤维素酶处理总糖（%）22.50、还原糖（%）20.50、果胶（%）9.03、淀粉（%）3.64。
4 结论
（1）组合添加外源酶制剂对烟叶的常规化学成分指标影响不明显，和对照样品相比除总氯含量有不同程度上升外，其余化学成分含量和对照相比变化不明显，经过方差分析她，发现不同浓度酶制剂处理对烟叶的化学成分影响不明显，达不到显著水平。总氯含量和对照相比有一定的增加，经方差分析发现不同浓度酶制剂组合对总氯含量的影响差异不显著。
（2）单一添加酶制剂可有针对性的调节烟叶的化学成分
通过试验发现，添加单一酶制剂，可以调节总糖、还原糖、淀粉和果胶等化学成分含量的改变。和对照相比，单一添加果胶酶，处理样品总糖、还原糖和淀粉含量略低于对照；单一添加淀粉酶，处理样品总糖、还原糖略低于对照，果胶和淀粉含量低于对照；单一添加蛋白酶，处理样品总糖、还原糖含量略低于对照，淀粉含量明显低于对照；单一添加纤维素酶，处理样品总糖和还原糖略含量略高于对照，淀粉含量明显低于对照。
5 结语
果胶酶、α-淀粉酶、酸性蛋白酶和纤维素酶主要用于催化果胶、淀粉、蛋白质和纤维素进行分解和转化，组合添加这4种酶制剂，可使烟叶进入一个动态反应平衡过程，进行循环反应，因而，反应的终产物不如单一添加更具针对性，但对烟叶品质的综合影响效果明显。从本次试验结果来看，如应用在生产中，需要结合不同的原料特性和生产设备特性进行系统研究，确定合适的添加剂量和作用条件。
（责任编辑：刘昀）
关键词 烟叶；外源酶制剂；烟叶醇化；常规化学成分；影响
中图分类号：S572 文献标志码：A 文章编号：1673-890X（2014）03-112-2
1 试验材料
2010年湖南郴州片烟，云87品种，等级B2FA，每个处理烟丝重量100 g。酶活度如下：纤维素酶30 μ/mg，酸性蛋白酶50 μ/mg，果胶酶30 u/mg，α-淀粉酶200 000 μ/mg。
2 试验方法
2.1 试验设计
先将样品在22±1℃，60%±2%相对湿度下平衡72 h。然后采用正交试验设计，用果胶酶、淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶处理，同时设置对照样品，恒温恒湿进行平衡，温度50±1℃，相对湿度60%±2%，处理时间5 h。另设计果胶酶、淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶单一处理，添加量分别为0.6 g、0.4 g、0.5 g、0.6 g。所有样品处理结束后将样品放在烘箱内80±1℃灭活2 h。
2.2 常规化学成分检测
化学成分检测按相关标准进行，主要检测烟碱、总糖、还原糖、总氮、总钾及总氯，并和对照样进行对比。
2.3 数据分析处理
所有检测结果均采用spss13.0进行统计分析，分析发现，纤维素酶对各个指标的影响均不显著，因此，最后的方差分析中，均将纤维素酶因素当着试验误差进行处理，不参与方差分析。
3 试验结果
3.1 酶制剂对烟叶常规化学成分影响
样品0-9号分别为：烟碱（%）3.47、3.42、3.33、3.32、3.33、3.33、3.37、3.33、3.35、3.32；总糖（%）22.44、21.21、22.53、21.46、22.35、21.61、22.61、22.31、22.32、22.45；还原糖（%）20.23、19.30、20.28、19.24、20.15、19.67、20.38、20.01、20.03、20.37；总氯（%）0.41、0.69、0.80、0.95、0.92、0.68、0.81、0.79.、0.94、0.65；总钾（%）2.39、2.41、2.34、2.35、2.36、2.42、2.37、2.42、2.40、2.40；总氮（%）1.94、1.97、1.94、2.09、2.08、2.10、1.94、2.21、2.24、2.12。
3.2 单一酶制剂处理对烟叶化学成分影响
对照处理总糖（%）22.44、还原糖（%）20.23、果胶（%）9.03、淀粉（%）4.01；果胶酶处理总糖（%）21.82、还原糖（%）19.08、果胶（%）9.11、淀粉（%）3.70；淀粉酶处理总糖（%）21.98、还原糖（%）20.02、果胶（%）8.97、淀粉（%）3.77；蛋白酶处理总糖（%）22.29、还原糖（%）20.20、果胶（%）9.49、淀粉（%）3.65；纤维素酶处理总糖（%）22.50、还原糖（%）20.50、果胶（%）9.03、淀粉（%）3.64。
4 结论
（1）组合添加外源酶制剂对烟叶的常规化学成分指标影响不明显，和对照样品相比除总氯含量有不同程度上升外，其余化学成分含量和对照相比变化不明显，经过方差分析她，发现不同浓度酶制剂处理对烟叶的化学成分影响不明显，达不到显著水平。总氯含量和对照相比有一定的增加，经方差分析发现不同浓度酶制剂组合对总氯含量的影响差异不显著。
（2）单一添加酶制剂可有针对性的调节烟叶的化学成分
通过试验发现，添加单一酶制剂，可以调节总糖、还原糖、淀粉和果胶等化学成分含量的改变。和对照相比，单一添加果胶酶，处理样品总糖、还原糖和淀粉含量略低于对照；单一添加淀粉酶，处理样品总糖、还原糖略低于对照，果胶和淀粉含量低于对照；单一添加蛋白酶，处理样品总糖、还原糖含量略低于对照，淀粉含量明显低于对照；单一添加纤维素酶，处理样品总糖和还原糖略含量略高于对照，淀粉含量明显低于对照。
5 结语
果胶酶、α-淀粉酶、酸性蛋白酶和纤维素酶主要用于催化果胶、淀粉、蛋白质和纤维素进行分解和转化，组合添加这4种酶制剂，可使烟叶进入一个动态反应平衡过程，进行循环反应，因而，反应的终产物不如单一添加更具针对性，但对烟叶品质的综合影响效果明显。从本次试验结果来看，如应用在生产中，需要结合不同的原料特性和生产设备特性进行系统研究，确定合适的添加剂量和作用条件。
（责任编辑：刘昀）