【摘 要】
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目的 探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)基因表达下调后对胶质瘤细胞的周期及凋亡的影响及其机制.方法 将携带针对LRIG1基因特异性RNA干扰序列及非特异性shRNA
【机 构】
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武汉,武钢总医院神经外科,华中科技大学同济医学院附属同济医院神经外科
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目的 探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)基因表达下调后对胶质瘤细胞的周期及凋亡的影响及其机制.方法 将携带针对LRIG1基因特异性RNA干扰序列及非特异性shRNA编码序列的质粒载体分别转染GL15细胞株,用G418(600 mg/L)筛选出稳定株后,Western blot法检测LRIG1蛋白表达的改变,PI(0.05 g/L)与Rnasine(0.5 g/L)标记后流式细胞仪检测对照组与实验组细胞的周期差异,Annexin V-FTTC/PI双标后用流式细胞仪观察两组细胞凋亡的改变.结果 成功获得干扰LRIG1基因的GL15细胞稳定株,实验组较对照组LRIG1基因表达下降54.7%.流式细胞仪分析显示,实验组的G2/M期细胞百分率较对照组明显增高(P＜0.01),实验组细胞的凋亡比例明显低于对照组(P＜0.01).讨论抑制LRIG1表达后,GL15细胞的抗凋亡能力明显增强并能使细胞阻滞在G2/M期.
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