【摘 要】
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采用前低渗、酶解、后低渗和盖片轻压相结合的方法，建立了激光法分离二倍体亚洲棉石系亚1号单条染色体技术。单染色体经去蛋白、酶切和PCR扩增后，产物以Southern杂交、简单重复
【机 构】
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中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室,安阳工学院生物与食品工程学院
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采用前低渗、酶解、后低渗和盖片轻压相结合的方法，建立了激光法分离二倍体亚洲棉石系亚1号单条染色体技术。单染色体经去蛋白、酶切和PCR扩增后，产物以Southern杂交、简单重复序列（Simplesequencerepeats，SSR）引物扩增和荧光原位杂交技术（Fluorescenceinsituhybridization，FISH）进行验证，构建了棉花单条染色体文库。克隆片段长度在150～1000bp，平均为550bp；文库包含1．38x10s个克隆，覆盖染色体长度1倍左右，空载率为1％，滴度为1．3&
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