目的:用不同方法制备富含血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)裂解液,在不同体积分数下找到最适成人骨髓间充质干细胞(human bone marrow stromal cells,hBMSCs)体外增殖及其向成骨细胞分化的PRP裂解液制备方法。方法:抽取成人骨髓20mL,采用密度梯度离心法分离骨髓,贴壁培养法获得成人骨髓间充质干细胞;抽取静脉血80mL,分别用1次离心法、2次离心法和3次离心法制备PRP,进行血小板计数分析。-80℃冻存后,反复解冻、冻存至少3次以上获得PRP裂解液;将第2代细胞分别培养在体积分数为5%、10%、15%、20%的不同方法获得的PRP裂解液的培养液中,24、48、72、96h后检测细胞的增殖状况;将第2代细胞分别培养在体积分数为5%、10%、15%、20%的PRP裂解液和不加PRP裂解液的成骨细胞诱导液中,观察骨髓间充质干细胞的成骨表达以及PRP裂解液对其成骨矿化的影响。结果:各组PRP裂解液均促进hBMSCs增殖作用,差异有统计学意义(均P<0.01),各组细胞增殖在体积分数15%PRP裂解液组、72h时达到峰值,其中3次离心方法获得的细胞增殖最明显。Vonkossa’s染色观察细胞的成骨作用,各组成骨细胞数量随着PRP裂解液浓度上升而增多。3种方法获得的PRP裂解液都在培养液体积分数15%时获得的成骨细胞数量最多,其中第3种离心方法获得的矿化结节较第1种离心方法、第2种离心方法明显。结论:PRP裂解液对hBMSCs的体外增殖有促进作用,并且第3种离心法制备PRP裂解液对细胞成骨表达和成骨矿化作用最明显。