【摘 要】
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TTC-脱氢酶还原法可用于检测和鉴别优良及退化蛹虫草菌株。这一方法的应用依赖测定参数的优化。本文优化了蛹虫草TTC-脱氢酶的测定方法,结果显示:测定蛹虫草TTC-脱氢酶活性时
【机 构】
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中山大学生命科学学院,广东省昆虫研究所,中国科学院华南植物园,
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TTC-脱氢酶还原法可用于检测和鉴别优良及退化蛹虫草菌株。这一方法的应用依赖测定参数的优化。本文优化了蛹虫草TTC-脱氢酶的测定方法,结果显示:测定蛹虫草TTC-脱氢酶活性时,培养6d的蛹虫草菌液先以生理盐水洗涤4次后配成0.15g/mL的待用菌液;反应缓冲液为Tris-HCl,最适pH值为8.4;最适反应温度为37℃、最适反应时间为3h。酶促反应完成后无需加终止剂,立即将样品放置冰上,4℃离心再以无菌水洗2次,用无水乙醇萃取便可测定吸光度得到脱氢酶活性。本文优化的蛹虫草TTC-脱氢酶活性检测方法具有测定结果稳定可靠、重现性好、准确度高、操作方便等优点。
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